Number of the records: 1
Analýza a biologické účinky nitrovaných mastných kyselin v rostlinách
Title statement Analýza a biologické účinky nitrovaných mastných kyselin v rostlinách [rukopis] / Hana Němčáková Additional Variant Titles Analýza a biologické účinky nitrovaných mastných kyselin v rostlinách Personal name Němčáková, Hana (dissertant) Translated title Analysis and biological effects of nitrated fatty acids in plants Issue data 2010 Phys.des. 86 s. Note Ved. práce Marek Petřivalský Another responsib. Petřivalský, Marek, 1969- (thesis advisor) Luhová, Lenka (opponent) Another responsib. Univerzita Palackého. Katedra biochemie (degree grantor) Keywords Oxid dusnatý * kyselina nitroolejová * kyselina nitrolinolová * xanthinoxidasa * protoplasty * Nitric oxide * nitrooleic acid * nitrolinoleic acid * xanthin oxidase * protoplasts Form, Genre diplomové práce master's theses UDC (043)378.2 Country Česko Language čeština Document kind PUBLIKAČNÍ ČINNOST Title Mgr. Degree program Navazující Degree program Biochemie Degreee discipline Biochemie book
Kvalifikační práce Downloaded Size datum zpřístupnění 82369-501912261.pdf 31 886.1 KB 28.04.2010 Posudek Typ posudku 82369-ved-162289311.pdf Posudek vedoucího 82369-opon-549044672.pdf Posudek oponenta Call number Barcode Location Sublocation Info DP-KBC/144 (PřF-KBO) 3134510397 PřF-Holice PřF, Knihovna Holice - sklad In-Library Use Only
Oxid dusnatý (NO) je již řadu let známý jako signální molekula účastnící se řady důležitých regulačních mechanismů za fyziologických i patologických podmínek. NO a další reaktivní formy dusíku reagují s lipidy obsahujícími nenasycené mastné kyseliny za vzniku nitrovaných sloučenin. Výskyt, funkce a biologické účinky nitrovaných mastných kyselin byly zatím pouze omezeně popsány u živočichů. Tato práce se zabývá studiem kyselin nitroolejové (OA-NO2) a nitrolinolové (LNO2). Tyto nitrované mastné kyseliny se nacházejí zejména ve volné formě v krvi a ve formě esterů v lipoproteinech krevní plasmy a membráně červených krvinek. Stimulují relaxaci hladké svaloviny, ovlivňují funkci krevních destiček a neutrofilů a influx vápníku do buněk. V poslední době jsou také studovány jako účinný ligand receptorů aktivujících proliferaci peroxisomů (PPARs). Bylo popsáno, že kyselina nitroolejová působí jako irreverzibilní inhibitor xanthinoxidasy (XOD). U rostlin nebyly tyto látky zatím prozkoumány. Praktická část práce zahrnovala syntézu a analýzu OA-NO2 a LNO2. Analýza byla provedena pomocí metod HPLC a LC-MS. S použitím komerčně dostupné kyseliny nitroolejové byla v získaném preparátu stanovena její koncentrace. Preparáty byly použity pro studium účinku nitrovaných mastných kyselin na životnost a produkci NO a ROS u protoplastů z Arabidopsis thaliana. Dále byla purifikována XOD z kravského mléka. Byla stanovena její aktivita a inhibice kyselinou nitroolejovou. Výsledky byly porovnány měřením s komerčně dostupnou XOD z podmáslí a bakteriální XOD. Pro srovnání inhibicí byl pro měření použit syntetický inhibitor XOD allopurinol. Detekce preparátů nitrovaných mastných kyselin ze syntézy byla provedena autografickou metodou po chromatografii na tenké vrstvě. Byly potvrzeny inhibiční účinky OA-NO2 u xanthinoxidasy. Dále bylo zjištěno, že nitrované mastné kyseliny mají pozitivní vliv na životnost protoplastů.Nitric oxide (NO) has been known for many years as a signalling molecule participating in many important regulatory mechanisms under physiological and pathological conditions. NO and other reactive forms of nitrogen react with lipids containing unsaturated fatty acid to yield nitrated compounds. Presence, function and biological influences of nitrated fatty acids have been described only in animals. This thesis concerns with the research of nitrooleic and nitrolinoleic acids. They are present both as free and esterified species in human red cell membranes and plasma lipids. They stimulate the relaxation of smooth muscles, influence the function of platelets and neutrophiles and calcium influx into cells. Recently this species have been studied as efficient ligands for peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs). It was reported that nitrooleic acid is irreversible inhibitor of xanthin oxidase (XOD). These compounds have not been studied in plants so far. The experimental part contains the synthesis and analysis of nitrooleicacid and nitrolinoleic acid (OA-NO2 and LNO2). The methods of HPLC and LC-MS were used. The concentration of nitrooleic acid in preparation was determined by using commercial standard of nitrooleic acid. The obtained compound was used for the research of the influence of nitrated fatty acid on viability and production of NO and ROS in protoplasts from Arabidopsis thaliana. The XOD was purified from bovine milk. Its activity and inhibition by nitrooleic acid was measured. The results were compared by measuring activity and inhibition of commercial XOD from butter milk and XOD from microorganisms. Synthetic inhibitor allopurinol was used to compare the inhibitions. The TLC autographic method for the detection of nitrated fatty acid from synthesis was used. The inhibitory effect of OA-NO2 in XOD was confirmed. It was determinated that nitrated fatty acids have positive effect on protoplast viability.
Number of the records: 1