Number of the records: 1
Molekulárně genetická charakterizace transgenních linií ječmene s vyřazenými geny pro mitogenem aktivované proteinkinásy jejich imunitní odpoveď n flg22
Title statement Molekulárně genetická charakterizace transgenních linií ječmene s vyřazenými geny pro mitogenem aktivované proteinkinásy jejich imunitní odpoveď n flg22 [rukopis] / Elizaveta Chubar Additional Variant Titles Molekulárně genetická charakterizace transgenních linií ječmene s vyřazenými geny pro mitogenem aktivované protein kinasy a jejich imunitní odpověď na flg22 Personal name Chubar, Elizaveta, (dissertant) Translated title Molecular genetics characterisation of transgenic barley lines with disrupted genes for mitogen-activated protein kinases and their immune response to flg22 Issue data 2020 Phys.des. 67 s. (97 098 znaků). : il., grafy, tab. Note Oponent Ludmila Ohnoutková Ved. práce Pavel Křenek Another responsib. Ohnoutková, Ludmila (opponent) Křenek, Pavel (thesis advisor) Another responsib. Univerzita Palackého. Centrum regionu Haná (degree grantor) Keywords Hordeum vulgare * mitogenem aktivovaná proteinkinása * CRISPR/Cas9 * letalita * flg22 * Hordeum vulgare * mitogen-activated protein kinase * CRISPR/Cas9 * lethality * flg22 Form, Genre diplomové práce master's theses UDC (043)378.2 Country Česko Language čeština Document kind PUBLIKAČNÍ ČINNOST Title Mgr. Degree program Navazující Degree program Biochemie Degreee discipline Biotechnologie a genové inženýrství book
Kvalifikační práce Downloaded Size datum zpřístupnění 00254394-109128209.pdf 0 13.5 MB 31.12.2999 Posudek Typ posudku 00254394-ved-675632922.pdf Posudek vedoucího 00254394-opon-619503409.pdf Posudek oponenta Průběh obhajoby datum zadání datum odevzdání datum obhajoby přidělená hodnocení typ hodnocení 00254394-prubeh-933333439.docx 25.09.2018 09.06.2020 08.07.2020 1 Hodnocení známkou
V předkládané práci byly charakterizovány transgenní linie ječmene setého odrůdy Golden Promise s CRISPR/Cas9 mutovaným genem pro mitogenem aktivovanou proteinkinásu 6 HvMPK6 (HvMPK6-KO) a s TALENem vyřazeným genem pro mitogenem aktivovanou proteinkinásu 3 HvMPK3 (HvMPK3-KO). Nejprve bylo genotypováno pomocí sekvenování 121 jedinců T2 potomstva HvMPK6-KO linie. V rámci této analýzy bylo identifikováno 58 jedinců divokého typu a 63 jedinců mutovaných v cílové oblasti třetího exonu HvMPK6 genu, přičemž žádný z mutovaných jedinců nebyl homozygot v mutaci v HvMPK6 genu. Bližší analýza 51 mutovaných jedinců ukázala, že se jedná o heterozygoty tvořené knock-out HvMPK6 alelou a HvMPK6 alelou divokého typu. Dohromady tyto výsledky naznačují, že homozygotní (posunové) mutace v HvMPK6 genu způsobují letalitu nebo embryo-letalitu. Dále byla studována role HvMPK3 v regulaci exprese genů spojených s patogenezí (PR). Exprese PR genů byla indukována v kořenech HvMPK3-KO a kontrolních linií působením 1 ?M flg22 po dobu 6 hodin. Nebyl pozorován rozdíl v míře indukce exprese PR genů mezi HvMPK3-KO a kontrolními liniemi.Transgenic barley lines of variety Golden Promise with CRISPR/Cas9-mutated gene for mitogen-activated protein kinase 6 HvMPK6 (HvMPK6-KO) and with TALEN-disrupted gene for mitogen-activated protein kinase 3 HvMPK3 (HvMPK3-KO) were characterized in the present thesis. Initially, 121 T2 progenies of HvMPK6-KO line were genotyped by sequencing. By means of this analysis, 58 wild type (wt) and 63 individuals mutated in the target region of HvMPK6 gene were identified. However, none of the mutated individuals was homozygous for the mutation in HvMPK6 gene. More detailed analysis of 51 mutated individuals showed they were heterozygotes comprised of a knock-out HvMPK6 allele and a wt HvMPK6 allele. Taking together this results indicate that homozygous (frame-shift) mutations in HvMPK6 gene cause lethality or embryo-lethality in barley. Furthermore, the role of HvMPK3 in the regulation of pathogenesis related (PR) genes expression was studied. Expression of PR genes was induced by six-hour treatment of the roots of HvMPK3-KO and control lines with 1 ?M flg22. There was no difference observed in the induction of PR genes expression between HvMPK3-KO and control lines.
Number of the records: 1