Number of the records: 1
Klonování histidin kinasových receptorů z Arabidopsis thaliana a příprava expresních vektorů pod nativním a konstitutivním promotorem
Title statement Klonování histidin kinasových receptorů z Arabidopsis thaliana a příprava expresních vektorů pod nativním a konstitutivním promotorem [rukopis] / Tereza Slaninová Additional Variant Titles Klonování histidin kinasových receptorů z Arabidopsis thaliana a příprava expresních vektorů pod nativním a konstitutivním promotorem Personal name Slaninová, Tereza (dissertant) Translated title Cloning of histidin kinase receptors from Arabidopsis thaliana and preparation of expression vectors under the control of native and constitutive promoters Issue data 2012 Phys.des. 53 s. : il., schémata, tab. + 1 CD ROM Note Ved. práce Ondřej Plíhal Another responsib. Plíhal, Ondřej (thesis advisor) Another responsib. Univerzita Palackého. Katedra biochemie (degree grantor) Keywords Cytokininy * cytokininové receptory * signální dráha * Cytokinis * cytokinin receptors * signal pathway Form, Genre bakalářské práce bachelor's theses UDC (043)378.22 Country Česko Language čeština Document kind PUBLIKAČNÍ ČINNOST Title Bc. Degree program Bakalářský Degree program Biochemie Degreee discipline Biochemie book
Kvalifikační práce Downloaded Size datum zpřístupnění 00171430-885738863.pdf 36 1 MB 31.07.2012 Posudek Typ posudku 00171430-ved-109878588.doc Posudek vedoucího 00171430-opon-328382562.doc Posudek oponenta Call number Barcode Location Sublocation Info BP-KBC/141 (PřF-KBO) 3134513554 PřF-Holice PřF, Knihovna Holice - sklad In-Library Use Only
Cytokininy patří do třídy fytohormonů, které mají klíčovou roli v průběhu rostlinného života. Ovlivňují buněčné dělení, regulaci růstu a větvení prýtu a kořene, vývoj chloroplastů a regulují další důležité procesy v rostlině. V Arabidopsis jsou cytokininy vnímány třemi histidin kinasami - CRE1/WOL/AHK4, AHK2 a AHK3, které zahajují intracelulární fosfátový přenos. Konečným krokem přenosu signálu je exprese cílových genů regulujících metabolismus cytokininů a další návazné procesy. Prvním krokem této práce byla PCR amplifikace histidin kinasových receptorů AHK3 a AHK4 a jejich promotorových oblastí z rostliny Arabidopsis thaliana. Vyizolované AHK receptory a promotory byly rekombinovány BP reakcí s pDONR vektory pomocí systému MultiSite Gateway. Rekombinantní směs byla podrobena transformaci a následně byla provedena minipreparativní izolace plasmidové DNA. Cílem bylo získání tzv. ,,entry klonů", obsahující klonované geny a promotory. Entry klony byly podrobeny kontrolní sekvenaci a následně byly použity pro další rekombinantní LR reakce s cílovým vektorem (pK7m34GW) pro získání N-terminálních GFP fúzí. Touto reakcí byly získány finální expresní vektory, které je možno použít pro transformaci rostlin.Cytokinins belong to a class of phytohormones that play a key role in plant development. They promote cell division, regulate growth and are also involved in shoot and root branching, chloroplast development and other processes in plants. In Arabidopsis cytokinins are recognized by receptor histidine kinases - CRE1/WOL/AHK4, AHK2 and AHK3 which initiate intracellular phosphate transfer. The final step in signal transduction is expression of target genes involved in the regulation of cytokinin metabolism and other processes. The first part of the project was PCR amplification of histidine kinase receptors AHK3 and AHK4 and their promoter regions from Arabidopsis thaliana. The recombination of isolated AHK receptors and promoters was achieved by BP reaction with pDONR vectors (used a system MultiSite Gateway). Afterwards, the sample was transformed and MiniPrep isolation of plasmid DNA was performed. The goal was obtaining of ?entry clones? containing inserted genes and promoters. Entry clones were checked by sequencing and used for another recombination LR reactions with the destination vector (pK7m34GW) to obtain N-terminal GFP fusions. The reaction was successful and the expression vectors were gained and those can be used in plant transformation.
Number of the records: 1