Neuroaktivní steroidy jsou steroidní látky přírodního nebo syntetického původu, které jsou schopny ovlivňovat funkce nervového systému. K biosyntéze endogenních neuroaktivních steroidů dochází jednak přímo v nervovém systému (pro tuto skupinu se vžilo označení neurosteroidy) a také v periferních tkáních. Ke změnám hladin těchto steroidů může docházet vlivem neurodegenerativních onemocnění. Právě neurodegenerace je typická pro roztroušenou sklerózu. Cílem této práce bylo metabolické profilování vybraných neuroaktivních steroidů v krevním séru mužů s diagnostikovanou roztroušenou sklerózou a v krevním séru mužů kontrolní skupiny pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií. U obou analyzovaných skupin se podařilo kvantifikovat dehydroepiandrosteron, testosteron, pregnenolon a progesteron. Allopregnanolon a ani konjugáty pregnanolonu detekovány nebyly. Studium vlivu roztroušené sklerózy na změny hladin steroidních hormonů mohou napomoct k objevu nových přístupů v diagnostice nebo dokonce léčbě tohoto onemocnění centrální nervové soustavy.Neuroactive steroids are a group of natural or synthetic steroid compounds able to influence the nervous system functions. Neuroactive endogenous steroids are biosynthesised either directly in the nervous system (so-called neurosteroids) or in peripheral tissues. The levels of these steroids may be influenced by neurodegenerative diseases. Neurodegeneration is typical for the multiple sclerosis. The aim of this work was the metabolic profiling of selected neuroactive steroids in the blood serum of men diagnosed with multiple sclerosis and of men in control group using ultra-high pressure liquid chromatography-tandem mass spectrometry. For both groups, dehydroepiandrosterone, testosterone, pregnenolone and progesterone were quantified. Allopregnanolone and pregnanolone conjugates were not detected. Studying the influence of multiple sclerosis on steroid hormone levels may be helpful in finding new approaches in diagnosis and treatment of this central nervous system disease.