Number of the records: 1
Průkaz a stanovení vybraných amatoxinů ve vzorcích s biologickou matricí
Title statement Průkaz a stanovení vybraných amatoxinů ve vzorcích s biologickou matricí [rukopis] / Veronika Saparová Additional Variant Titles Průkaz a stanovení vybraných amatoxinů ve vzorcích s biologickou matricí Personal name Saparová, Veronika (dissertant) Translated title Detection and determination of selected amatoxins in samples with biological matrix Issue data 2015 Phys.des. 71 s. (12 129 znaků) : il., grafy, tab. Note Ved. práce Petr Fryčák Oponent Pavlína Ginterová Another responsib. Fryčák, Petr (thesis advisor) Ginterová, Pavlína (opponent) Another responsib. Univerzita Palackého. Katedra analytické chemie (degree grantor) Keywords alfa-amanitin * beta-amanitin * LC-MS * muchomůrka zelená * SPE extrakce * alfa-amanitine * beta-amanitine * LC-MS * Amanita phalloides * SPE extraction Form, Genre diplomové práce master's theses UDC (043)378.2 Country Česko Language čeština Document kind PUBLIKAČNÍ ČINNOST Title Mgr. Degree program Navazující Degree program Chemie Degreee discipline Analytická chemie book
Kvalifikační práce Downloaded Size datum zpřístupnění 00187411-993002204.pdf 95 1.3 MB 24.04.2015 Posudek Typ posudku 00187411-ved-620484988.pdf Posudek vedoucího 00187411-opon-618989539.pdf Posudek oponenta Průběh obhajoby datum zadání datum odevzdání datum obhajoby přidělená hodnocení typ hodnocení 00187411-prubeh-598472351.pdf 01.10.2012 24.04.2015 18.05.2015 1 Hodnocení známkou
Tato diplomová práce se zabývá problematikou houbových otrav především faloidního typu, které jsou způsobeny požitím muchomůrky zelené. Teoretická část diplomové práce popisuje různé druhy otrav, toxiny způsobující otravu organismu a také množství metod, které již byly vyvinuty za účelem rychlého a spolehlivého stanovení houbových toxinů. Praktická část diplomové práce se zaměřuje na vyvinutí rychlé a jednoduché LC-MS metody pro stanovení amatoxinů muchomůrky zelené a to konkrétně alfa-amanitinu a beta-amanitinu. K tomuto účelu bylo použito spojení vysokoúčinné kapalinové chromatografie s hmotností detekcí využívající trojitý kvadrupól. V praktické části je zahrnuta také extrakce a stanovení těchto toxinů v muchomůrce zelené, v houbové polévce a v moči. Vzorky moče byly spikovány alfa-amanitinem na koncentraci 5 ng/ml. Kvantifikace amatoxinů probíhala metodou kalibrační křivky sestrojené za použití kyseliny dinitrobenzoové jako interního standardu. Extrakce analytů byla provedena na SPE kolonkách. Použitím dipeptidu při SPE se zvýšila návratnost amatoxinů na 94 %. Metoda je dostatečně citlivá jak pro stanovení amatoxinů například ve zbytcích potravy, tak v moči, kde je obsah amatoxinů nižší. Alfa-amanitin byl derivatizován dansyl-chloridem za účelem zvýšení odezvy. Bylo zjištěno, že derivatizace nemá významný vliv na odezvu alfa-amanitinu. Metodou bylo dosaženo meze detekce 5 ng/ml pro alfa-amanitin a 10 ng/ml pro beta-amanitin. Mez kvantifikace byla stanovena na 30 ng/ml pro alfa-amanitin a 100 ng/ml pro beta-amanitin.This diploma thesis deals with mushroom poisoning especially of faloidic type which is caused by ingestion of Amanita phalloides. The theoretical part of the thesis describes various types of poisoning, toxins which cause poisoning of an organism and also a lot of methods that have been developed for rapid and reliable determination of fungal toxins. Experimental part of the thesis aims to develop rapid and simple LC-MS method for the determination of amatoxins of Amanita phalloides namely alfa-amanitine and beta-amanitine. This was achieved by employing high performance liquid chromatography with mass spectrometric detection using a triple quadrupole analyser. The experimental part also includes the extraction, determination and quantification of these amatoxins in Amanita phalloides, mushroom soup and urine. The urine samples were spiked with alfa-amanitine at a concentration of 5 ng/ml. The quantification of the amatoxins was based on a calibration curve that had been created using dinitrobenzoic acid as an internal standard. The extraction of the analytes was perfomed using SPE columns. Recovery of the amatoxins have increased to 94 % using a dipeptide during the SPE. The method is sufficiently sensitive to determine the amatoxins both in e.g. residues of food and in the urine samples, where the content of the amatoxins is lower. Alfa-amanitine was derivatized with dansyl-chloride in order to increase its response. It was found, however that the derivatization had no significant effect on increasing its response. The method has reached a detection limit of 5 ng/ml for the alfa-amanitine and 10 ng/ml for the beta-amanitine. The limit of quantification was set at 30 ng/ml for the alfa-amanitine and 100 ng/ml for the beta-amanitine.
Number of the records: 1