Number of the records: 1
Editace genu HvABCG11 u jarního ječmene
Title statement Editace genu HvABCG11 u jarního ječmene [rukopis] / Hedvika Šlanhofová Additional Variant Titles Editace genu HvABCG11 u jarního ječmene Personal name Šlanhofová, Hedvika, (dissertant) Translated title HvABCG11 gene editing in spring barley Issue data 2022 Phys.des. 93 Note Ved. práce Tomáš Vlčko Oponent Vojtěch Hudzieczek Another responsib. Vlčko, Tomáš, (thesis advisor) Hudzieczek, Vojtěch, (opponent) Another responsib. Laboratoř růstových regulátorů (degree grantor) Keywords ABC transportér * ječmen jarní * CRISPR/Cas9 * HvABCG11 * transformace * ABC transporter * spring barley * CRISPR/Cas9 * HvABCG11 * transformation Form, Genre diplomové práce master's theses UDC (043)378.2 Country Česko Language čeština Document kind PUBLIKAČNÍ ČINNOST Title Mgr. Degree program Navazující Degree program Biologie Degreee discipline Experimentální biologie book
Kvalifikační práce Downloaded Size datum zpřístupnění 00282387-350592379.pdf 0 1.9 MB 08.08.2022 Posudek Typ posudku 00282387-ved-788168340.doc Posudek vedoucího 00282387-opon-288589789.pdf Posudek oponenta Průběh obhajoby datum zadání datum odevzdání datum obhajoby přidělená hodnocení typ hodnocení 00282387-prubeh-249122334.pdf 03.09.2019 08.08.2022 31.08.2022 A Hodnocení známkou
Gen HvABCG11 ječmene jarního kóduje protein řadící se mezi ABC transportéry. ABC transportéry jsou transmembránové proteiny poháněné hydrolýzou ATP. Podskupina ABCG transportérů hraje roli v odpovědi na abiotický a biotický stres, v transportu fytohormonů nebo v transportu strukturních komponent. V experimentální části byla provedena analýza genu HvABCG11 a jeho promotorové oblasti a in silico navržen expresní vektor k indukci mutace genu HvABCG11. K vytvoření mutace bylo využito místně specifické nukleasy CRISPR/Cas9. Expresní vektor obsahující CRISPR-Cas9 systém byl transformován A. tumefaciens do nezralých embryí ječmene jarního odrůdy Golden Promise. Genotypizace rostlin byla provedena za použití molekulárních technik, PCR a sekvenováním. Efektivita transformace dosahovala 2,4 %. Žádná regenerující rostlina T0 generace neobsahovala mutaci. Analýza rostlin ječmene jarního T1 potvrdila přítomnost stabilního transgenu Cas9.The spring barley HvABCG11 gene encodes a protein classified as an ABC transporter. ABC transporters are transmembrane proteins driven by ATP hydrolysis. A subset of ABCG transporters plays a role in the response to abiotic and biotic stress, transport of phytohormones or transport of structural components. In the experimental part, the HvABCG11 gene and its promoter region were analyzed and an expression vector was designed in silico to create a mutation of the HvABCG11. The site-specific nuclease CRISPR/Cas9 was used to create the mutation. The expression vector containing the CRISPR-Cas9 system was transformed by A. tumefaciens into immature embryos of spring barley cv. Golden Promise. Genotyping of the plants was performed using molecular techniques, PCR and sequencing. The transformation efficiency was 2.4%. No regenerating T0 generation plant contained the mutation. Analysis of T1 spring barley plants confirmed the presence of a stable Cas9 transgene.
Number of the records: 1