Number of the records: 1  

Sodno-draselná ATPasa - exprese, purifikace a její interakce s malýi molekulami

  1. Title statementSodno-draselná ATPasa - exprese, purifikace a její interakce s malýi molekulami [rukopis] / Jaroslava Šeflová
    Additional Variant TitlesPříprava mutantů Na+/K+-ATPázy a jejich studium metodami fluorescenční spektroskopie
    Personal name Geletičová, Jaroslava (dissertant)
    Translated titleThe preparation of the Na+/K+-ATPase mutants and their study using methods of fluorescence spectroscopy
    Issue data2017
    Phys.des.177 : grafy, schémata, tab.
    NoteVed. práce Martin Kubala
    Ved. práce Martin Kubala
    Another responsib. Kubala, Martin, 1977- (thesis advisor)
    Kubala, Martin, 1977- (školitel)
    Another responsib. Univerzita Palackého. Katedra biofyziky (degree grantor)
    Keywords sodno-draselná ATPasa * exprese v bakteriích * exprese v kvasinkách * C45 klička * C23 klička * Baginského metoda určení ATPasové aktivity * flavonolignany * halogenované chinolony * cisplatina * sodium-potassium ATPase * heterologous expression in bacteria * heterologous expression in yeast * C45 loop * C23 loop * Baginsky assay * flavonolignans * halogenated quinolones * cisplatin
    Form, Genre disertace dissertations
    UDC (043.3)
    CountryČesko
    Languageangličtina
    Document kindPUBLIKAČNÍ ČINNOST
    TitlePh.D.
    Degree programDoktorský
    Degree programFyzika
    Degreee disciplineBiofyzika
    book

    book

    Kvalifikační práceDownloadedSizedatum zpřístupnění
    00204101-783191784.pdf20851.6 MB21.09.2017
    PosudekTyp posudku
    00204101-ved-510099482.pdfPosudek vedoucího
    00204101-opon-770329587.pdfPosudek oponenta
    Průběh obhajobydatum zadánídatum odevzdánídatum obhajobypřidělená hodnocenítyp hodnocení
    00204101-prubeh-126863937.pdf01.09.200921.09.201711.01.2018S2

    Dizertační práce se zaměřuje na studium významného membránového proteinu, sodno-draselné pumpy. Tento enzym svou funkcí vytváří elektrochemický gradient, který je významný pro celou řadu buněčných procesů. V případě nesprávné funkce sodno-draselné ATPasy dochází ke vzniku patologických stavů, poruch a nemocí. Cílem této práce bylo studovat souvislosti mezi strukturou a funkcí toho proteinu s využitím dostupných experimentálních postupů. Příprava celé sodno-draselné pumpy byla provedena dvěma metodami - přímou izolací z tkáně a heterologní expresí v kvasinkách. Enzym izolovaný z prasečích ledvin byl použit pro zkoumání inhibice sodno-draselné pumpy po interakci s flavonolignany, halogenovanými chinolony a platinovými cytostatiky. Změna aktivity enzymu byla detekována pomocí modifikované Baginského metody, která určuje koncentraci fosfátu z hydrolýzy ATP. Dále byly heterologní expresí v bakteriích připraveny izolované cytoplasmatické segmenty proteinu (C45 a C23 kličky). Tyto kličky umožňují zkoumat interakci sodno-draselné pumpy a biologicky významných látek rozpustných ve vodných pufrech. Vybrané aktivní látky byly cílem dalšího výzkumu zaměřeného na odhalení vazebného místa a mechanismu inhibice enzymu.The Na+/K+-ATPase (NKA) is an essential membrane protein establishing electrochemical gradient used in cell processes. Dysfunction of NKA leads to pathological states and diseases. This thesis is focused on the relations between structure and function using available experimental approaches. Whole protein was prepared by two methods - direct isolation from porcine kidney and by heterologous expression in yeast. NKA isolated from porcine kidney was used for testing of biologically active molecules such as potential drugs (flavonolignans, halogenated hydroquinolones and platinum-based complexes). Furthermore, we studied the interactions of promising molecules inhibiting NKA activity using the modified Baginsky assay. Isolated cytoplasmic parts of the enzyme, represented by C23 and C45 loops, were used for determination of their binding site and for study of inhibitory mechanism.

Number of the records: 1  

  This site uses cookies to make them easier to browse. Learn more about how we use cookies.