Number of the records: 1
Příprava rekombinantního enzymu metabolismu sacharidů v sóji
Title statement Příprava rekombinantního enzymu metabolismu sacharidů v sóji [rukopis] / Petr Plevák Additional Variant Titles Příprava rekombinantního enzymu metabolismu sacharidů v sóji Personal name Plevák, Petr (dissertant) Translated title Preparation of the recombinant enzyme involved in carbohydrates metabolism of soybeans Issue data 2016 Phys.des. 65 s. (14 755 znaků). Note Oponent Mária Šmehilová Ved. práce Lenka Dzurová Another responsib. Šmehilová, Mária, 1982- (opponent) Dzurová, Lenka (thesis advisor) Another responsib. Univerzita Palackého. Katedra buněčné biologie a genetiky (degree grantor) Keywords Metabolismus sacharidů * sója * alfa-galaktosidasa * P. pastoris X-33 * klonování * exprese proteinu * Metabolism of carbohydrates * soybeans * alpha-galactosidase * P. pastoris X-33 * cloning * protein expression Form, Genre bakalářské práce bachelor's theses UDC (043)378.22 Country Česko Language čeština Document kind PUBLIKAČNÍ ČINNOST Title Bc. Degree program Bakalářský Degree program Biologie Degreee discipline Molekulární a buněčná biologie book
Kvalifikační práce Downloaded Size datum zpřístupnění 00203877-698441076.pdf 38 2.1 MB 11.05.2016 Posudek Typ posudku 00203877-ved-215334054.pdf Posudek vedoucího 00203877-opon-359388352.pdf Posudek oponenta Call number Barcode Location Sublocation Info BP-KBB/268 (PřF-KBO) 3134520413 PřF-Holice PřF, Knihovna Holice - sklad In-Library Use Only
Alfa-galaktosidasy jsou enzymy katalyzující hydrolýzu galaktosových reziduí v oligosacharidech a polymerních galaktomananech, přičemž se liší svou substrátovou preferencí. V minulosti se alfa-galaktosidasy získávaly výhradně izolací z mikroorganismů, kdežto dnes jsou již díky metodám molekulární biologie připravovány rekombinantně v různých expresních systémech. Experimentální část byla zaměřena na přípravu dvou konstruktů pPICZA::MelA a pGAPZA::MelA vhodných pro expresi v kvasinkách. Pro jejich získání byly použity metody molekulárni biologie jako je transformace, izolace DNA, restrikce, ligace či PCR. Na závěr byly optimalizovány podmínky exprese rekombinantní alfa-galaktosidasy, přičemž její přítomnost v různých typech médií byla detekována pomocí SDS-PAGE nebo spektrofotometrickým měřením enzymatické aktivity.Alpha-galactosidases are enzymes that catalyze the hydrolysis of galactose residues in oligosaccharides and polymer galactomannans. They differ in substrate specificity. In the past, alpha-galactosidases were obtained just through isolation from microorganisms but nowadays they can be prepared recombinantly in various expression systems by the use of molecular biology methods. The experimental part is focuse on preparation of two different constructs pPICZA::MelA and pGAPZA::MelA, which are suitable for expression in yeasts. They were prepared by the use of molecular biology methods such as transformation, DNA isolation, restriction, ligation and PCR. Finally, the expression conditions of recombinant alpha-galactosidase were optimized. The production of enzyme was monitored by SDS-PAGE in different media types or by spectrophotometric measurement of enzymatic activity.
Number of the records: 1