Number of the records: 1
Příprava transgenních rostlin Secale cereale se samčí sterilitou
Title statement Příprava transgenních rostlin Secale cereale se samčí sterilitou [rukopis] / Aneta Wandrolová Additional Variant Titles Příprava transgenních rostlin Secale cereale se samčí sterilitou Personal name Wandrolová, Aneta (dissertant) Translated title Preparation of transgenic plants Secale cereale with male sterility Issue data 2013 Phys.des. 83 Note Ved. práce Petr Galuszka Oponent Hana Pospíšilová Another responsib. Galuszka, Petr (thesis advisor) Pospíšilová, Hana (opponent) Another responsib. Univerzita Palackého. Katedra biochemie (degree grantor) Keywords Biolistika * Secale cereale L. * barnasa * samčí sterilita * tapetum * Biolistics * Secale cereale L. * male sterility * barnase * tapetum Form, Genre diplomové práce master's theses UDC (043)378.2 Country Česko Language čeština Document kind PUBLIKAČNÍ ČINNOST Title Mgr. Degree program Navazující Degree program Biochemie Degreee discipline Biochemie book
Kvalifikační práce Downloaded Size datum zpřístupnění 00179534-811146788.pdf 26 3.9 MB 02.05.2013 Posudek Typ posudku 00179534-ved-827172691.pdf Posudek vedoucího 00179534-opon-477613075.pdf Posudek oponenta Call number Barcode Location Sublocation Info DP-KBC/212 (PřF-KBO) 3134515464 PřF-Holice PřF, Knihovna Holice - sklad In-Library Use Only
Cílem diplomové práce bylo připravit transgenní rostliny žita se samčí sterilitou. Standardně vyšlechtěné sterilní rostliny žita jsou používané pro produkci heterózního osiva a také jednou z podmínek pro produkci námele. Nezralé embrya žita byla transformována biolistickou metodou. Pro transformaci byly použity dva plasmidy pAHC25: PE1-barnase-nos a pAHC25: TA27-barnase-nos. Oba obsahovaly gen pro barnasu pod tapetově specifickým promotorem (PE1 ? rýže, TA27 ? tabák) a gen selekce na herbicid fosfinotricin. Běhen několika stovek transformací finálně zregenerovalo více než dvě stě rostlin žita a přes deset rostlin ječmene. Po analýze regenerovaných rostlin molekulárně biologickými metodami bylo zjištěno, že získané rostliny nebyly transgenní. Nicméně, byla zavedena metoda transformace a optimalizovány podmínky regenerace rostlin z embryonálních kalusů. Negativní výsledek experimentů ukázal, že k dosažení vytyčeného cíle bude třeba zvolit jinou metodu transformace či jiný plasmid s aditivní selekcí na antibiotikum.The aim of the present study was to prepare transgenic rye plants with male sterility. Classically bred sterile rye hybrids are used for production of heterosis seeds and as a major component for field production of ergot. Immature embryos of rye were transformed by biolistic method using gene gun. Two plasmids pAHC25: PE1-barnase-nos and pAHC25: TA27-barnase-nos were used for transformation. Both plasmids contain gene for barnase under the control of tapetum specific promotors (PE1 from rice, TA27 from tobacco) and phosphinotricin resistance gene. After hundreds of transformation events, approximately two hundreds of rye plants and more than ten barley plants regenerated. Analysis of these regenerants by molecular biology methods revealed that obtained plants were not transgenic. Nevertheless, new method for transformation was introduced to the laboratory and conditions for in vitro rye plants regeneration from embryonic calli were optimized. Negative result of experiments indicates that other method of transformation with additive selection against antibiotics has to be used to achieve planned aim.
Number of the records: 1