Number of the records: 1
Příprava modelu pro studium vlivu vybraných glykosyltransferas na tvorbu O-glykanů imunoglobulinu A
Title statement Příprava modelu pro studium vlivu vybraných glykosyltransferas na tvorbu O-glykanů imunoglobulinu A [rukopis] / Jana Nováková Additional Variant Titles Příprava modelu pro studium vlivu vybraných glykosyltransferas na tvorbu O-glykanů imunoglobulinu A Personal name Nováková, Jana (dissertant) Translated title The development of a model for the analysis of selected glycosyltransferases involvement in IgA1 O-glycans formation Issue data 2011 Phys.des. 79 s. Note Ved. práce Milan Raška Another responsib. Křupka, Michal, 1981- (opponent) Raška, Milan, 1967- (thesis advisor) Another responsib. Univerzita Palackého. Katedra biochemie (degree grantor) Keywords imunoglobulin A1 * IgA nefropatie * glykosylace * glykosyltransferasy * Dakiki * immunoglobulin A1 * IgA nephropathy * glycosylation * glycosyltransferases * Dakiki Form, Genre diplomové práce master's theses UDC (043)378.2 Country Česko Language čeština Document kind PUBLIKAČNÍ ČINNOST Title Mgr. Degree program Navazující Degree program Biochemie Degreee discipline Biochemie book
Kvalifikační práce Downloaded Size datum zpřístupnění 110927-295519746.pdf 159 11.3 MB 26.04.2011 Posudek Typ posudku 110927-ved-941525972.pdf Posudek vedoucího 110927-opon-268118819.pdf Posudek oponenta Call number Barcode Location Sublocation Info DP-KBC/163 (PřF-KBO) 3134509718 PřF-Holice PřF, Knihovna Holice - sklad In-Library Use Only
IgA nefropatie je charakterická ukládáním imunoglobulinu A1 (IgA1) v ledvinách a následným rozvojem mesangioproliferativní glomerulonefritidy. Tyto IgA1 jsou abnormálně O-glykosylovány. O-glykany v pantové oblasti IgA1 vykazují sníženou míru galaktosylace. Pro účely experimentu zabývajícího se zapojením jednotlivých glykosyltransferas na tvorbě aberantních O-glykanů byly připraveny bicistronické plasmidy nesoucí geny pro sialyltransferasu ST6GalNAcII a galaktosyltransferasu C1GalT1 v kombinaci s genem pro zelený fluorescenční protein. Jako model pro studium glykosylace IgA1 byla zvolena buněčná linie Dakiki. Tato linie secernuje IgA1, který je svou O-glykosylací podobný patologickému IgA1 u IgA nefropatie. IgA1 je možné ze supernatantu kultury izolovat pomocí imunoafinitní chromatografie. Nejvhodnější metodou pro transfekci buněk Dakiki je nukleofekce. Na základě exprese vneseného genu pro zelený fluorescenční protein lze transfekované buňky Dakiki z celkové populace separovat. Buněčná linie Dakiki je vhodným modelem pro studium O-glykosylace IgA1.IgA nephropathy is characterized by the deposition of immunoglobulin A1 (IgA1) in the kidney mesangium with subsequent mesangioproliferative glomerulonephritis development. O-glycans attached to the hinge region of such IgA1 are hypogalactosylated. To selectively increase the intracellular level of two glycosyltransferases crucial for hinge region O-glycosylation two bicistronic plasmids were constructed; first coding for sialyltransferase (ST6GalNAcII) plus green fluorescence protein, second coding for galactosyltransferase (C1GalT1) plus green fluorescence protein. Human cell line Dakiki was chosen as a model for the study of IgA1 glycosylation. This cell line secretes IgA1 into the culture medium. IgA1 can be isolated from the culture supernatant by immunoaffinity chromatography. The most suitable method for transfection of Dakiki cells is the nucleofection. We shoved, that it is possible to separate the transfected cells based on the expression of green fluorescence protein. Dakiki cell line presents a suitable model for the study of IgA1 O-glycosylation.
Number of the records: 1