Reaktivní aldehydy jsou spojovány s řadou negativních účinků na organismus. Důsledkem mohou být neurodegenerativní onemocnění, diabetes, onemocnění plic a další. Předmětem této práce je především 3 aminopropanal (APAL), který se v organismu tvoří oxidací polyaminů sperminu a spermidinu. Nejčastěji je spojován s ischemií mozku, kde způsobuje apoptózu/nekrózu buněk. Kromě toho APAL poskytuje eliminací amoniaku akrolein (ACRO), který je ještě reaktivnější než APAL. Díky elektrofilním vlastnostem aldehydů jsou tyto látky schopny tvořit adukty s nukleofilními makromolekulami jako jsou DNA a proteiny. Při reakci s proteiny dochází nejčastěji k tvorbě Michaelových aduktů nebo Schiffových bází s rezidui cysteinu a lysinu. V diplomové práci jsem se zaměřila na analýzu modifikací aminokyselin, peptidů a proteinů reakcí s APAL nebo ACRO metodou MALDI TOF MS a MALDI LIFT-TOF/TOF MS/MS. Nejdříve bylo stanoveno optimální pH pro tvorbu aduktů. Nejlepší alternativou se ukázalo pH 8, ve které probíhaly následné analýzy. Co se týče modifikací aminokyselin, ve většině případů docházelo k reakci s thiolovými skupinami za vzniku hemithioacetalu, který po následné cyklizaci vytvořil thiazolidinový derivát. Při reakci s aminoskupinou vznikala Schiffova báze. U peptidů a proteinů byly převládajícími modifikacemi Michaelovy adukty a Schiffovy báze, avšak v menší míře se vyskytovaly také FDP-lysin (N-(3-formyl-3,4-dehydro-piperidino)lysin) a MP-lysin (N-(3-methylpyridinium)lysin). Kromě modifikací cysteinu a lysinu se objevovaly také modifikace histidinu, argininu a N-konce peptidů/proteinů. Při porovnání reaktivity mezi APAL a ACRO se potvrdila vyšší reaktivita akroleinu. Dále se zjistilo, že v případě APAL dochází nejdříve k tvorbě ACRO a až poté k modifikaci peptidů/proteinů. Intenzita signálů aduktů vytvořených po inkubaci s ACRO byla vyšší a jejich tvorba rychlejší než u vzorků modifikovaných APAL. Hodnoty m/z signálů modifikovaných peptidů se mezi vzorky modifikovanými APAL/ACRO nelišily. Výsledky potvrdily, že primárními cíli reaktivních aldehydů jsou především Cys a Lys a hlavními modifikacemi se jeví Schiffovy báze a Michaelovy adukty.Reactive aldehydes are associated with several negative effects on the organism, which may cause neurodegenerative diseases, diabetes, lung diseases and others. This work is focused namely on 3-aminopropanal (APAL), which is formed in the body by oxidation of the polyamines spermine and spermidine. It is most associated with cerebral ischemia, where it induces cell apoptosis/necrosis. Furthermore, APAL yields acrolein (ACRO) through the elimination of ammonia, which is even more reactive aldehyde than APAL. Due to the electrophilic properties of aldehydes, these substances are capable of forming adducts with nucleophilic macromolecules such as DNA and proteins. Reaction with proteins typically leads to the formation of Michael adducts or Schiff bases with cysteine and lysine residues. In my master thesis I focused on the analysis of modifications of amino acids, peptides and proteins using APAL and ACRO by MALDI TOF MS and MALDI LIFT TOF/TOF MS. First, the optimal pH for adduct formation was determined. The best option proved to be pH 8, in which subsequent analyses took place. Regarding the modification of amino acids, in most cases, reaction with thiol groups occurred, resulting in the formation of a hemithioacetal, which after subsequent cyclization formed a thiazolidine derivative. Reaction with amino groups led to the formation of Schiff bases. In peptides and proteins, Michael adducts, and Schiff bases were the predominant modifications, but FDP lysine (N-(3-formyl-3,4-dehydropiperidino)lysine) and MP lysine (N-(3-methylpyridinium)lysine) were also present to a lesser extent. In addition to the reacted cysteine and lysine, modifications of histidine, arginine and the N terminus of peptides/proteins were also observed. Comparing the reactivity between APAL and ACRO confirmed the higher reactivity of ACRO. Furthermore, it was found that in the case of APAL, ACRO formation occurs first, followed by the modification of peptides/proteins. The intensity of signals from adducts formed after incubation with ACRO was higher, and their formation was faster compared to samples modified with APAL. The m/z values of the modified peptide signals did not differ between samples modified by APAL/ACRO. The results confirmed that the primary targets of reactive aldehydes are primarily Cys and Lys, and the main modifications appear to be Schiff bases and Michael adducts. Záhlaví-akce Hodnotový management charity (2011 : Zellingen, Německo) Nakladatel[Přelouč] : [Charita], [2012] Fyz.popis74 s. : ilustrace ISBN978-80-260-1361-7 (brožováno) PoznámkaPřeloženo z němčiny? 200 výtisků Akce se konala v Zellingen - Retzbach pod záštitou Diecézní charity Würzburg Poznámky o skryté bibliografii a rejstřícíchObsahuje bibliografii Předmět.hesla sociální práce social work * charitativní činnost charities * hodnotová orientace value orientation * hodnotový management value management Forma, žánr sborníky konferencí proceedings of conferences Konspekt364-1/-7 - Druhy sociální pomoci a služeb