Diplomová práca sa venuje problematike vývoja a validácie metódy pomocou kvapalinovej chromatografie v spojení s hmotnostnou spektrometriou pre stanovenie ôsmich antiepileptických liečiv z ľudského krvného séra. Epilepsia je neurologické ochorenie, ktorým trpí 8-9 osôb na 1000 ľudí. Táto diplomová práca sa venuje konkrétne antiepileptikám ako sú: levetiracetam, gabapentín, brivaracetam, zonisamid, primidón, lakosamid, lamotrigín a perampanel. Monitorovanie liekových hladín antiepileptík je dôležité v klinickej praxi za účelom dosiahnutia bezpečného a účinného liečebného režimu aj cez variabilitu farmakokinetických parametrov medzi rôznymi jedincami. Toto monitorovanie je často vykonávané technikou LC/MS. Bola vyvinutá a validovaná LC-MS/MS metóda, ktorou je možné stanoviť spomínané antiepileptiká z ľudského krvného séra. Ako interný štandard bol použitý kofeín. Metóda bola overená analýzou spikovaných modelových vzoriek v negatívnom krvnom séru. Pri fragmentačných spektrách MS2 (MS3) boli navrhnuté aj štruktúry patriace daným fragmentom jednotlivých liečiv. Táto metóda môže byť použitá aj vo forenznej praxi , preto je v diplomovej práci venovaná pozornosť aj tejto oblasti.The diploma thesis deals with the development and validation of a method using liquid chromatography in conjunction with mass spectrometry for the determination of eight antiepileptic drugs from human blood serum. Epilepsy is a neurological disease that affects 8-9 individuals per 1000 people. This diploma thesis deals specifically with antiepileptics such as: levetiracetam, gabapentine, brivaracetam, zonisamide, primidone, lacosamide, lamotrigine and perampanel. Therapeutic drug monitoring of antiepileptics is important in clinical practise in order to achieve safe and efficient treatment for all patients despite the variability of pharmacokinetic parameters among individuals. A LC-MS/MS method was developed and validated, by which it is possible to determine the mentioned antiepileptics from human blood serum. Caffeine was used as an internal standard. The method was verified by analyzing spiked model samples in negative blood serum. In MS2 (MS3) fragmentation spectra, structures belonging to given fragments of drugs were also proposed. The mehod can also be used in forensic practise, which is why the diploma thesis also pays attention to this area.