Tato práce je zaměřena na analýzu hypericinu, látku ze skupiny naftodianthronů, vyskytující se především v třezalce tečkované (Hypericum perforatum) a příbuzných druzích. Třezalka má velmi široké léčebné využití, které má v lidové medicíně tisíciletou historii. V dnešní době se přípravky z třezalky stále více využívají především k léčbě depresivních stavů a nespavosti, avšak velmi významné jsou rovněž účinky antibakteriální, antivirotické a antioxidační. V posledních letech se často skloňuje využití hypericinu při tzv. fotodynamické terapii, která se ukazuje nadějnou zejména při léčbě kožního melanomu. V rámci této diplomové práce byla navržena jednoduchá isokratická metoda pro stanovení hypericinu v alkoholických tinkturách pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) ve spojení s elektrochemickým a spektrofotometrickým detektorem. Tradičním postupem byl připraven ethanolický macerát z květů čerstvě nasbírané byliny. Tato tinktura byla, společně s dalšími komerčně dostupnými tinkturami, analyzována pomocí vyvinuté HPLC metody a následně byly všechny extrakty porovnávány z hlediska nalezeného obsahu hypericinu. Pro kvantifikaci byla zvolena metoda vnějšího standardu a kalibrační křivky. Hypericin je látka s prokázanou citlivostí vůči světelnému záření. Čerstvý extrakt z květů byl vystaven účinkům slunečního světla a UV záření o vlnové délce 365 nm. Pomocí HPLC byly průběžně monitorovány přeměny hypericinu a dalších látek vlivem expozice světlem. V obou případech byl pozorován nejprve nárůst obsahu hypericinu (pravděpodobně díky konverzi protoforem), při delší expozici však jeho obsah postupně klesá.This work is focused on the analysis of hypericin, a compound from the naphthodithrone group, occurring mainly in St. John's wort (Hypericum perforatum) plant and related species. St. John's wort has a very wide range of medicinal uses, which have a history of thousands of years in folk medicine. Nowadays, St. John's wort preparations are increasingly popular mainly to treat mild depression and insomnia, however, its antibacterial, antiviral and antioxidant effects are also important. In recent years, the use of hypericin in so-called photodynamic therapy, which is particularly promising in the treatment of cutaneous melanoma, has frequently been mentioned. In the framework of this thesis, a simple isocratic method for the determination of hypericin in alcoholic tinctures was proposed using high-performance liquid chromatography (HPLC) in combination with electrochemical and/or spectrophotometric detector. An ethanolic macerate was prepared from the flowers of a freshly collected herb by a traditional procedure. This tincture, along with other commercially available tinctures, was analyzed using the developed HPLC method and subsequently all extracts were compared for hypericin content. The external standard method with calibration curve was chosen for quantification. Hypericin is a substance known to be sensitive to light radiation. The fresh flower extract was exposed to both sunlight and UV radiation (365 nm). The transformations of hypericin and other substances due to light exposure were continuously monitored by HPLC. In both cases, an initial increase of hypericin was observed (probably due to proto-forms conversion), but with prolonged exposure its content gradually decreased.