Number of the records: 1
Regeneration and transformation of mature embryos of B73 maize line
Title statement Regeneration and transformation of mature embryos of B73 maize line [rukopis] / David Ušák Additional Variant Titles Regenerace a transformace zralých embryí linie B73 kukuřice seté Personal name Ušák, David, (dissertant) Translated title Regeneration and transformation of mature embryos of B73 maize line Issue data 2020 Phys.des. 53 s (123 000 znaků) : il., tab. Note Ved. práce Jan Bartoš Oponent Vojtěch Hudzieczek Another responsib. Bartoš, Jan (thesis advisor) Hudzieczek, Vojtěch, (opponent) Another responsib. Univerzita Palackého. Centrum regionu Haná (degree grantor) Keywords kukuřice * transformace * in vitro regenerace * zralá semena * B73 * Agrobacterium tumefaciens * maize * transformation * in vitro regeneration * mature seeds * B73 * Agrobacterium tumefaciens Form, Genre bakalářské práce bachelor's theses UDC (043)378.22 Country Česko Language angličtina Document kind PUBLIKAČNÍ ČINNOST Title Bc. Degree program Bakalářský Degree program Biochemie Degreee discipline Biotechnologie a genové inženýrství book
Kvalifikační práce Downloaded Size datum zpřístupnění 00254367-648025404.pdf 25 3.9 MB 01.06.2020 Posudek Typ posudku 00254367-ved-339310244.pdf Posudek vedoucího 00254367-opon-885852891.pdf Posudek oponenta Průběh obhajoby datum zadání datum odevzdání datum obhajoby přidělená hodnocení typ hodnocení 00254367-prubeh-528605921.docx 25.09.2019 01.06.2020 07.07.2020 1 Hodnocení známkou
Genetická transformace rostlin je klíčová metoda základního i aplikovaného výzkumu rostlin. I když byly v minulosti vyvinuté univerzální, vysoce efektivní transformační systémy pro desítky modelových rostlin, transformace kukuřice jako zástupce jednoděložných rostlin zůstává stále neúčinná. Transformace explantátů odvozených ze zralých semen pomocí Agrobacterium již byla popsána dřív, avšak žádný efektivní transformační protokol nebyl dosud publikován. Cílem této bakalářské práce, bylo ověřit dostupné regenerační systémy pro regeneraci meristematických kultur, odvozených ze zralých embryí zaužívané linie kukuřice seté, B73. Regenerační efektivita po 13 týdnech kultivace in vitro a následném přesunu do půdy ex vitro, dosáhla 0,9 - 5,9%. Tranzientní a stabilní transformace pomocí Agrobacterium, nesoucí vektor pCAMBIA 1303 s genem GUSA, byla provedena pro otestování susceptibility odvozených explantátů vůči dostupným transformačním systémům. GUS histochemický test byl vykonán pro zjištění eficience tranzientní a stabilní transformace, která dosáhla 80%, respektive 55,7%. Následné pokusy regenerovat transformované explantáty v dospělé rostliny byly ale neúspěšné.The genetic transformation of plants is the key method in both basic and applied plant research. Even if there have been universal, high-efficiency transformation systems developed for dozens of model plants, maize, among other monocotyledonous species still remains recalcitrant to most efforts. The use of Agrobacterium for the transformation of explants derived from mature seeds, has already been proposed in the past, however, no effective protocol has been established yet. In this bachelor thesis, the focus was to examine available regeneration systems for the regeneration of mature embryo-derived meristem cultures of a well-established maize line B73. Regeneration rate of 0.9 - 5.9% was reached after up to 13 weeks of in vitro cultivation and subsequent soil transfer. Both transient and stable Agrobacterium-mediated transformation with pCAMBIA 1303 harboring GUSA, was performed to analyze the amenability of the explants to the existing transformation systems. GUS histochemistry assay was used to test both transient and stable transformation rate, which reached 80% and 55.7%, respectively. Subsequent attempts to regenerate mature plants containing the transgene were unsuccessful.
Number of the records: 1