Number of the records: 1  

Optimalizace metod pro stanovení antimikrobiální aktivity extraktů z řasy Chlorella sorokiniana

  1. Title statementOptimalizace metod pro stanovení antimikrobiální aktivity extraktů z řasy Chlorella sorokiniana [rukopis] / Tereza Vránová
    Additional Variant TitlesOptimalizace metod pro stanovení antimikrobiální aktivity extraktů z řasy Chlorella sorokiniana
    Personal name Vránová, Tereza (dissertant)
    Translated titleOptimization of methods for testing antimicrobial activity of extracts from algae Chlorella sorokiniana
    Issue data2019
    Phys.des.80 s. : tab. + 1 CD
    NoteOponent Michaela Sedlářová
    Ved. práce Jiří Danihlík
    Another responsib. Sedlářová, Michaela, 1973- (opponent)
    Danihlík, Jiří (thesis advisor)
    Another responsib. Univerzita Palackého. Katedra biochemie (degree grantor)
    Keywords včela medonosná * antimikrobiální aktivita * Chlorella sorokiniana * acetonový extrakt * minimální inhibiční koncentrace * Paenibacillus larvae * honeybee * antimicrobial activity * Chlorella sorokiniana * acetone extract * minimum inhibitory concentration Paenibacillus larvae
    Form, Genre diplomové práce master's theses
    UDC (043)378.2
    CountryČesko
    Languagečeština
    Document kindPUBLIKAČNÍ ČINNOST
    TitleMgr.
    Degree programNavazující
    Degree programBiochemie
    Degreee disciplineBiochemie
    book

    book

    Kvalifikační práceDownloadedSizedatum zpřístupnění
    00225286-554725823.pdf01.6 MB31.12.2999
    PosudekTyp posudku
    00225286-ved-275585831.pdfPosudek vedoucího
    00225286-opon-455889725.pdfPosudek oponenta

    Včela medonosná (Apis mellifera) hraje v zemědělství velmi důležitou roli. Nejen, že včely svým opylováním zvyšují produktivitu a kvalitu zemědělských plodin, ale také nám poskytují produkty hojně využívané v potravinářství (med, pyl) nebo v lékařském odvětví (včelí jed, mateří kašička, propolis, včelí vosk). Mezi nejzávažnější včelí onemocnění bakteriálního původu patří mor včelího plodu. Za toto onemocnění je zodpovědná bakterie Paenibacillus larvae, která vytváří velmi odolné spory a ty jsou pro mladé včelí larvy vysoce infekční. Pomocí ERIC primerů lze rozlišit čtyři genotypy bakterie P. larvae, které se liší nejen svým vzhledem kolonií, ale také četností výskytu, místem výskytu i virulencí. V teoretické části práce jsou popsány bakteriální včelí nákazy, proces sporulace bakterií a přírodní antimikrobiální látky včetně metod testování jejich antimikrobiálního účinku. Praktická část je poté zaměřena na testování antimikrobiálního účinku acetonových extraktů řasy Chlorella sorokiniana proti bakterii P. larvae genotypu ERIC I a ERIC II. Byla optimalizována metoda měření růstových křivek pro stanovení minimální inhibiční koncentrace (MIC) acetonových extraktů a byla stanovována životnost bakterií s využitím měření fluorescence a barviva resazurinu. Ze získaných hodnot byla stanovena relativní životnost buněk při MIC daného extraktu. Bylo otestováno 9 frakcí extraktů řasy separované pomocí RP HPLC. Nejlepší účinky vykazoval extrakt frakce číslo 7, jehož MIC proti oběma genotypům P. larvae byla 6,3 ?g.ml-1. Naopak bez účinku byl extrakt frakce číslo 16. Nakonec bylo optimalizováno množství přidávaného FDA k suspenzi živých buněk, množství PI k suspenzi mrtvých buněk a stanovena délka inkubace. Pro stanovení počtu živých a mrtvých buněk v suspenzi bakterií po přidání potenciální antimikrobiální látky pomocí fluorescenčního mikroskopu bude třeba metodu dále optimalizovat.Honey bees (Apis mellifera) play a very important role in agriculture. They not only increase the productivity and quality of crops with their pollination, but they also provide us with products widely used in the food industry (honey, pollen) or in the pharmaceutical sector (bee venom, royal jelly, propolis, beeswax). American foulbrood is one of the most serious bacterial bee diseases. The disease is caused by the bacterium Paenibacillus larvae, which produces very resistant spores and these are highly infectious for young bee larvae. ERIC primers are used to distinguish four genotypes of P. larvae, which differ not only in their colony appearance but also in their frequency, location and virulence. The theoretical part of the thesis consists of description bacterial bee diseases, process of sporulation in bacteria and natural antimicrobial substances including methods of testing their antimicrobial effect. The practical part is focused on testing the antimicrobial effect of acetone extracts of algae Chlorella sorokiniana against the bacterium P. larvae of the ERIC I and ERIC II genotypes. The growth curves measuring method for determining the minimum inhibitory concentration (MIC) of acetone extracts was optimized and the viability of bacteria was determined using fluorescence measurements and resazurin dye. From the obtained values the relative viability of the cells at the MIC of the given extract was determined. Alltogether 9 fractions of algae extract separated by RP-HPLC were tested. Fraction number 7, which MIC against both P. larvae genotypes was 6.3 ?g.ml-1, showed the best effects. On the contrary, no effect was extract of fraction number 16. Finally, the amount of FDA added to the living cell suspension, the amount of PI added to dead cell suspension and incubation length were optimized. To determine the number of viable and dead cells in a bacterial suspension after the addition of a potential antimicrobial agent using a fluorescence microscope, the method will need to be further optimized.

Number of the records: 1  

  This site uses cookies to make them easier to browse. Learn more about how we use cookies.