Number of the records: 1
Vliv pH na aktivitu ureasy pro GC/MS metabolomiku lidské moči
Title statement Vliv pH na aktivitu ureasy pro GC/MS metabolomiku lidské moči [rukopis] / Eliška Ivanovová Additional Variant Titles Vliv pH na aktivitu ureasy pro GC/MS metabolomiku lidské moči Personal name Ivanovová, Eliška, (dissertant) Translated title The impact of pH on urease activity for GC/MS based human urine metabolomics Issue data 2018 Phys.des. 45 s. (68 246 znaků) : grafy, schémata, tab. Note Oponent Kristýna Pospíšilová Ved. práce Jaroslava Jáčová Another responsib. Pospíšilová, Kristýna, (opponent) Jáčová, Jaroslava (thesis advisor) Another responsib. Laboratoř růstových regulátorů (degree grantor) Keywords metabolomika * moč * močovina * ureasa * plynová chromatografie s hmotnostní spektrometrií * metabolomics * urine * urea * urease * gas chromatograph/mass spectrometry Form, Genre bakalářské práce bachelor's theses UDC (043)378.22 Country Česko Language čeština Document kind PUBLIKAČNÍ ČINNOST Title Bc. Degree program Bakalářský Degree program Biologie Degreee discipline Experimentální biologie book
Kvalifikační práce Downloaded Size datum zpřístupnění 00225600-336017523.pdf 15 1.4 MB 15.05.2018 Posudek Typ posudku 00225600-ved-237026277.doc Posudek vedoucího 00225600-opon-399904132.doc Posudek oponenta Průběh obhajoby datum zadání datum odevzdání datum obhajoby přidělená hodnocení typ hodnocení 00225600-prubeh-391897682.pdf 01.04.2017 15.05.2018 14.06.2018 1 Hodnocení známkou
Močovina, nejhojnější složka močové matrice, interferuje GC/MS analýze moči, a proto je nezbytné ji před analýzou odstranit. Tradičně se za tímto účelem používá kyselá extrakce do organického rozpouštědla. Alternativní přístup využívá enzymu ureasy. Cílem práce je porovnání obou přístupů přípravy vzorku a stanovení vlivu přítomnosti aditiv (CO2 a HCl) na aktivitu ureasy. Zatímco extrakční protokol významně mění metabolom moči, ureasa pouze odstraní močovinu. Odstranění močoviny však není úplné a reprodukovatelné. Aplikace CO2 v průběhu ureasové reakce umožní úplné odstranění močoviny ze všech vzorků. Má však negativní dopad na analytickou variabilitu ostatních metabolitů. Okyselení vzorků pomocí HCl (6 M) umožnilo depleci močoviny bez změny metabolomu, ale pouze v jediném případě. Při pokusu o zopakování experimentu došlo k denaturaci enzymu. Aplikace méně koncentrované HCl (1 M) nabízí slibné řešení tohoto problému.Urea, the most abundant component of a urinary matrix, interferes the GC/MS analysis of the urine sample. Therefore, it is removed by liquid-liquid extraction or treatment by urease prior the analysis. The aim of the work is to compare both above mentioned sample preparation approaches and to evaluate the impact of the presence of additives (CO2, HCl) on the urease activity. While extraction protocol significantly alters the urinary metabolome, urease specifically removes just the urea. Presence of CO2 in the urease reaction enables total depletion of urea in all samples, but it increases the analytical variability of metabolites. Usage of HCl (6 M) allowed complete urea removal with no impact on the metabolome, however in another experiment it caused the denaturation of the enzyme. Application of 1M HCl offers solution of this problem.
Number of the records: 1