Number of the records: 1  

Vliv pH na aktivitu ureasy pro GC/MS metabolomiku lidské moči

  1. Title statementVliv pH na aktivitu ureasy pro GC/MS metabolomiku lidské moči [rukopis] / Eliška Ivanovová
    Additional Variant TitlesVliv pH na aktivitu ureasy pro GC/MS metabolomiku lidské moči
    Personal name Ivanovová, Eliška, (dissertant)
    Translated titleThe impact of pH on urease activity for GC/MS based human urine metabolomics
    Issue data2018
    Phys.des.45 s. (68 246 znaků) : grafy, schémata, tab.
    NoteOponent Kristýna Pospíšilová
    Ved. práce Jaroslava Jáčová
    Another responsib. Pospíšilová, Kristýna, (opponent)
    Jáčová, Jaroslava (thesis advisor)
    Another responsib. Laboratoř růstových regulátorů (degree grantor)
    Keywords metabolomika * moč * močovina * ureasa * plynová chromatografie s hmotnostní spektrometrií * metabolomics * urine * urea * urease * gas chromatograph/mass spectrometry
    Form, Genre bakalářské práce bachelor's theses
    UDC (043)378.22
    CountryČesko
    Languagečeština
    Document kindPUBLIKAČNÍ ČINNOST
    TitleBc.
    Degree programBakalářský
    Degree programBiologie
    Degreee disciplineExperimentální biologie
    book

    book

    Kvalifikační práceDownloadedSizedatum zpřístupnění
    00225600-336017523.pdf141.4 MB15.05.2018
    PosudekTyp posudku
    00225600-ved-237026277.docPosudek vedoucího
    00225600-opon-399904132.docPosudek oponenta
    Průběh obhajobydatum zadánídatum odevzdánídatum obhajobypřidělená hodnocenítyp hodnocení
    00225600-prubeh-391897682.pdf01.04.201715.05.201814.06.20181Hodnocení známkou

    Močovina, nejhojnější složka močové matrice, interferuje GC/MS analýze moči, a proto je nezbytné ji před analýzou odstranit. Tradičně se za tímto účelem používá kyselá extrakce do organického rozpouštědla. Alternativní přístup využívá enzymu ureasy. Cílem práce je porovnání obou přístupů přípravy vzorku a stanovení vlivu přítomnosti aditiv (CO2 a HCl) na aktivitu ureasy. Zatímco extrakční protokol významně mění metabolom moči, ureasa pouze odstraní močovinu. Odstranění močoviny však není úplné a reprodukovatelné. Aplikace CO2 v průběhu ureasové reakce umožní úplné odstranění močoviny ze všech vzorků. Má však negativní dopad na analytickou variabilitu ostatních metabolitů. Okyselení vzorků pomocí HCl (6 M) umožnilo depleci močoviny bez změny metabolomu, ale pouze v jediném případě. Při pokusu o zopakování experimentu došlo k denaturaci enzymu. Aplikace méně koncentrované HCl (1 M) nabízí slibné řešení tohoto problému.Urea, the most abundant component of a urinary matrix, interferes the GC/MS analysis of the urine sample. Therefore, it is removed by liquid-liquid extraction or treatment by urease prior the analysis. The aim of the work is to compare both above mentioned sample preparation approaches and to evaluate the impact of the presence of additives (CO2, HCl) on the urease activity. While extraction protocol significantly alters the urinary metabolome, urease specifically removes just the urea. Presence of CO2 in the urease reaction enables total depletion of urea in all samples, but it increases the analytical variability of metabolites. Usage of HCl (6 M) allowed complete urea removal with no impact on the metabolome, however in another experiment it caused the denaturation of the enzyme. Application of 1M HCl offers solution of this problem.

Number of the records: 1  

  This site uses cookies to make them easier to browse. Learn more about how we use cookies.