Number of the records: 1  

Analýza imunogenních vlastností rekombinantních antigenů spirochety Borrelia burgdorferi

  1. Title statementAnalýza imunogenních vlastností rekombinantních antigenů spirochety Borrelia burgdorferi [rukopis] / Michaela Sopko
    Additional Variant TitlesAnalýza imunogenních vlastností rekombinantních antigenů spirochety Borrelia burgdorferi
    Personal name Sopko, Michaela (dissertant)
    Translated titleAnalysis of the immunogenic properties of recombinant antigens of the spirochete Borrelia burgdorferi
    Issue data2016
    Phys.des.82 str. (111 385 znaků) + 1 CD
    NoteVed. práce Michal Křupka
    Oponent Josef Mašek
    Another responsib. Křupka, Michal (thesis advisor)
    Mašek, Josef (opponent)
    Another responsib. Univerzita Palackého. Katedra buněčné biologie a genetiky (degree grantor)
    Keywords Borrelia burgdorferi * Osp antigeny * rekombinantní OspA * lymská borelióza * Borrelia burgdorferi * Osp antigens * recombinant OspA * Lyme disease
    Form, Genre diplomové práce master's theses
    UDC (043)378.2
    CountryČesko
    Languagečeština
    Document kindPUBLIKAČNÍ ČINNOST
    TitleMgr.
    Degree programNavazující
    Degree programBiologie
    Degreee disciplineMolekulární a buněčná biologie
    book

    book

    Kvalifikační práceDownloadedSizedatum zpřístupnění
    00193843-793683526.pdf341.1 MB28.04.2016
    PosudekTyp posudku
    00193843-ved-603449195.pdfPosudek vedoucího
    00193843-opon-317683182.pdfPosudek oponenta
    Call numberBarcodeLocationSublocationInfo
    DP-KBB/178 (PřF-KBO)3134520370PřF-HolicePřF, Knihovna Holice - skladIn-Library Use Only

    Ve své diplomové práci jsem se zabývala izolací a purifikací rekombinantního antigenu OspA spirochety Borrelia burgdorferi a vyhodnocením protilátkové odpovědi po experimentální vakcinaci laboratorních myší. V teoretické části jsem se věnovala popisu onemocnění zvaného lymská borelióza, a to mikrobiologii etiologické agens B. burgdorferi a jejím Osp antigenům, patogenezi, příznakům, diagnostice, prevenci, léčbě a epidemiologii. Zmínila jsem i problematiku vývoje vakcín proti tomuto onemocnění. V další části rešerše jsem popsala přípravu a izolaci rekombinantních proteinů, a to především pomocí His-tagu. Poslední část teoretického úvodu jsem věnovala tématu přítomnosti endotoxinu v roztocích rekombinantních proteinů a jeho odstranění. V praktické části jsem se zaobírala izolací a purifikací rekombinantního proteinu OspA pomocí HisPur Ni-NTA a Ni-NTA agarózy, zakoncentrováním roztoku proteinu a odstraněním endotoxinu. Po vakcinaci experimentálních myší jsem provedla vyhodnocení protilátkové odpovědi pomocí ELISA testů. Celkem bylo vakcinováno sedm skupin experimentálních myší po pěti jedincích. Každá skupina byla imunizována jiným druhem vakcíny, a to vakcínou skládající se z volného OspA v roztoku, OspA navázaného na lipozomy, OspA navázaného na lipozomy s adjuvans MT02, OspA navázaného na lipozomy s MT03, OspA navázaného na lipozomy s MT05, OspA navázaného na lipozomy s MT06 a OspA navázaného na lipozomy s MT07. Celkově nejvyššími hodnotami koncentrace stanovovaných imunoglobulinů se vyznačovala skupina experimentálních myší očkovaná rekombinantním anigenem OspA navázaným na lipozomy s MT06.In my diploma thesis, I have focused on isolation and purification of the recombinant antigen OspA of Borrelia burgdorferi spirochete and with assessment of antibody response after experimental vaccination of laboratory mice. In the theoretical part, I have focused on describing an illness called Lyme disease, namely microbiology of the etiological B. burgdorferi agent and its Osp antigens, pathogenesis, symptoms, diagnostics, prevention, treatment and epidemiology. I have also included the issues connected to developing vaccines against this illness. In the next part of my research, I have described preparation and isolation of recombinant proteins, especially using His-tag. I have dedicated the last part of the theoretical introduction to the topic of endotoxin in recombinant protein solution and of its removal. In the practical part, I have focused on the isolation and purification of the recombinant OspA protein using HisPur Ni-NTA and Ni-NTA agarose, on concentrating the protein solution and removing the endotoxin. After the vaccination of the experimental mice, I have performed an assessment of the antibody response using ELISA tests. In total, seven groups of five individuals of experimental mice was vaccinated. Each group was immunized with a different type of vaccine, these being a vaccine composed of a free OspA in a solution, OspA bound on liposomes, OspA bound on liposomes with MT02 adjuvant, OspA bound to liposomes with MT03, OspA bound on liposomes with MT05, OspA bound on liposomes with MT06 and OspA bound on liposomes with MT07. In total, the highest values of determined iminoglubulines concentration appeared with the group of mice vaccinated by the OspA recombinant antigen bound to liposomes with MT06.

Number of the records: 1  

  This site uses cookies to make them easier to browse. Learn more about how we use cookies.