Number of the records: 1
Lokalizace cytokininových receptorů Arabidopsis thaliana pomocí fluorescenčního značení
Title statement Lokalizace cytokininových receptorů Arabidopsis thaliana pomocí fluorescenčního značení [rukopis] / Karolina Kubiasová Additional Variant Titles Lokalizace cytokininových receptorů Arabidopsis thaliana pomocí fluorescenčního značení Personal name Kubiasová, Karolina (dissertant) Translated title Localization of cytokinin receptors in Arabidopsis thaliana using fluorescent labeling Issue data 2014 Phys.des. 95 s. (140 600 znaků) Note Ved. práce Ondřej Plíhal Oponent Anna Kuchařová Another responsib. Plíhal, Ondřej (thesis advisor) Kuchařová, Anna (opponent) Another responsib. Univerzita Palackého. Katedra biochemie (degree grantor) Keywords cytokininy * AHK3 * CRE1/AHK4 * lokalizace receptorů * fluorescenční značení * GFP * endoplasmatické retikulum * endosomy * brefeldin A * FM4-64 * 7-nitrobenzooxadiazol * konfokální mikroskopie * Gateway technologie * cytokinins * AHK3 * CRE1/AHK4 * localization of receptors * fluorescent labeling * GFP * endoplasmic reticulum * endosomes * brefeldin A * FM4-64 * 7-nitrobenzooxadiazole * confocal microscopy * Gateway technology Form, Genre diplomové práce master's theses UDC (043)378.2 Country Česko Language čeština Document kind PUBLIKAČNÍ ČINNOST Title Mgr. Degree program Navazující Degree program Biochemie Degreee discipline Biochemie book
Kvalifikační práce Downloaded Size datum zpřístupnění 00179511-433575327.pdf 81 1.5 MB 28.04.2014 Posudek Typ posudku 00179511-ved-792081461.pdf Posudek vedoucího 00179511-opon-744017197.pdf Posudek oponenta Průběh obhajoby datum zadání datum odevzdání datum obhajoby přidělená hodnocení typ hodnocení 00179511-prubeh-760652152.docx 01.09.2012 28.04.2014 26.05.2014 1 Hodnocení známkou Call number Barcode Location Sublocation Info DP-KBC/217 (PřF-KBO) 3134517188 PřF-Holice PřF, Knihovna Holice - sklad In-Library Use Only
Diplomová práce je zaměřena na studium lokalizace cytokininových receptorů pomocí fluorescenčního značení. V teoretické části byla provedena literární rešerše na téma cytokininy, percepce cytokininů se zaměřením na cytokininové receptory a jejich lokalizaci a na téma malé organické fluorescenční značky. V praktické části byl ověřen expresní konstrukt 35S::AHK3-GFP a byly připraveny dva další konstrukty pomocí Gateway technologie (35S::AHK4-GFP a 35S::AHK4-RFP). Buněčné suspenzní kultury Arabidopsis LER byly transformovány prostřednictvím A. tumefaciens nesoucí příslušný konstrukt. V této práci se poprvé podařilo odvodit buněčnou suspenzí kulturu Arabidopsis LER stabilně exprimující fluorescenčně značený receptor AHK3 pod kontrolou konstitutivního promotoru. Byla potvrzena lokalizace AHK3 a AHK4 receptorů v membráně endoplasmatického retikula. Jako alternativní přístup pro studium lokalizace cytokininových receptorů byla vyvinuta fluorescenční sonda iP-NBD. Kromě potvrzení lokalizace na membránách endoplasmatického retikula se v této práci podařilo ukázat, že cytokininové receptory se pravděpodobně nachází i v raných endosomech trans-Golgi sítě, kde mohou cyklovat mezi plasmatickou membránou a tímto buněčným kompartmentem.The practical part deals with the verification of expression construct 35S::AHK3-GFP. The two other constructs were prepared using Gateway technology (35S::AHK4-GFP and 35S::AHK4-RFP). Arabidopsis LER cell suspension cultures were transformed with the help of A. tumefaciens carrying appropriate construct. In this thesis Arabidopsis LER cell suspension culture stably expressing fluorescently labeled AHK3 receptor under the control of constitutive promoter was established for the first time. Localization of AHK3 and AHK4 receptors in the membrane of endoplasmic reticulum was verified. As an alternative approach for the study of localization of cytokinin receptors the fluorescent probe iP-NBD was developed. Using the above approches the localization of cytokinin receptors in the membrane of endoplasmic reticulum was verified. In addition, it was also showed that cytokinin receptors are located in early endosomes of the trans-Golgi network, where they can cycle between the plasma membrane and this cell compartment.
Number of the records: 1