Number of the records: 1
Charakterizácia dvoch nukleozid-N-ribohydroláz z machu (Physcomitrella patens)
Title statement Charakterizácia dvoch nukleozid-N-ribohydroláz z machu (Physcomitrella patens) [rukopis] / Eva Hájková Additional Variant Titles Charakterizace dvou nukleosid-N-ribohydrolas z mechu (Physcomitrella patens) Personal name Hájková, Eva (dissertant) Translated title Characterisation of two nucleoside-N-ribohydrolases from moss (Physcomitrella patens) Issue data 2013 Phys.des. 45 : il., grafy, schémata, tab. + CD ROM Note Oponent Marek Šebela Ved. práce Martina Tylichová Another responsib. Šebela, Marek, 1971- (opponent) Tylichová, Martina (thesis advisor) Another responsib. Univerzita Palackého. Katedra biochemie (degree grantor) Keywords nukleozid-N-hydroláza * mechúrovka odstávajúca (Physcomitrella patens) * purín * pyrimidín * nucleoside-N-ribohydrolase * Physcomitrella patens * purine * pyrimidine Form, Genre bakalářské práce bachelor's theses UDC (043)378.22 Country Česko Language slovenština Document kind PUBLIKAČNÍ ČINNOST Title Bc. Degree program Bakalářský Degree program Biochemie Degreee discipline Biochemie book
Kvalifikační práce Downloaded Size datum zpřístupnění 00179483-413201460.pdf 26 2.1 MB 06.05.2013 Call number Barcode Location Sublocation Info BP-KBC/142 (PřF-KBO) 3134515471 PřF-Holice PřF, Knihovna Holice - sklad In-Library Use Only
Táto práca sa zaoberá purifikáciou a charakterizáciou 2 nukleozid-N-ribohydroláz z machu mechúrovky odstávajúcej Physcomitrella patens (PpNRH). Teoretická časť sa venuje literárnej rešerši, ktorá zahŕňa metabolizmus purínov a pyrimidínov v rastlinách a výskyt nukleozid-N-ribohydroláz v rozmanitých organizmoch. Experimentálna časti je zameraná na expresiu PpNRH1 génu v bunkách E.coli a purifikáciu príslušných rekombinantných proteínov PpNRH1 (WT) a mutantnej formy Y244A pomocou afinitnej chromatografie. Analýza molekulových vlastností ukázala, že WT sa vyskytuje prednostne ako dimér, aj keď malá časť je schopná tvoriť tetramér. Ďalej bola študovaná teplotná stabilita enzýmu a nakoniec substrátová špecifita oboch enzýmov s použitím niekoľkých purínových a pyrimidínových ribozidov, pre ktoré boli stanovené kinetické parametre Km a Vlim.This thesis deals with purification and characterization of 2 nucleoside-N-ribohydrolase from moss named Physcomitrella patens (PpNRH). Theoretical part concerns literal research which includes metabolism of purines and pyrimidines in plants and occurrence of nucleoside-N-ribohydrolase in various organisms. The experimental part is focused on PpNRH1 gene expression in E. coli cells and purification of the recombinant proteins PpNRH1 (WT) and mutant Y244A by affinity chromatography. Analysis of the molecular properties showed that WT occurs priority as a dimer, while a small part is able to form a tetramer. There was also studied thermal stability of the enzyme and finally substrate specificity of both enzymes using several purine and pyrimidine ribosides, then have been established kinetic parameters Km and Vlim.
Number of the records: 1