Number of the records: 1  

Příprava mutované cytokinindehydrogenasy z cyanobakterií Nostoc 7120

  1. Title statementPříprava mutované cytokinindehydrogenasy z cyanobakterií Nostoc 7120 [rukopis] / Tereza Štenclová
    Additional Variant TitlesPříprava mutované cytokinindehydrogenasy z cyanobakterii Nostoc 7120
    Personal name Štenclová, Tereza (dissertant)
    Translated titlePreparation of mutated cytokinin dehydrogenase from the cyanobacterium Nostoc 7120
    Issue data2013
    Phys.des.55
    NoteVed. práce Marta Kowalska
    Oponent Veronika Smékalová
    Another responsib. Kowalska, Marta (thesis advisor)
    Smékalová, Veronika (opponent)
    Another responsib. Univerzita Palackého. Katedra buněčné biologie a genetiky (degree grantor)
    Keywords Cyanobakterie * cytokinindehydrogenasa * Pichia pastoris * Cyanobacteria * cytokinin dehydrogenase * Pichia pastoris
    Form, Genre bakalářské práce bachelor's theses
    UDC (043)378.22
    CountryČesko
    Languagečeština
    Document kindPUBLIKAČNÍ ČINNOST
    TitleBc.
    Degree programBakalářský
    Degree programBiologie
    Degreee disciplineMolekulární a buněčná biologie
    book

    book

    Kvalifikační práceDownloadedSizedatum zpřístupnění
    00158519-866311798.pdf28872.4 KB26.04.2013
    PosudekTyp posudku
    00158519-ved-874969707.pdfPosudek vedoucího
    00158519-opon-767252419.pdfPosudek oponenta
    Call numberBarcodeLocationSublocationInfo
    BP-KBB/184 (PřF-KBO)3134515545PřF-HolicePřF, Knihovna Holice - skladIn-Library Use Only

    Náplní mé bakalářské práce byla příprava enzymu cytokinindehydrogenasy ze sinice Nostoc PCC 7120 s mutací v aktivním místě. V teoretické části jsem se zabývala cyanobakteriemi, což jsou globálně rozšířené gramnegativní eubakterie a možní předchůdci rostlinných chloroplastů. Mohou fotosynteticky asimilovat a fixovat vzdušný dusík. Cyanobakterie Nostoc PCC 7120 má gen pro cytokinindehydrogenasu (CKX), tento enzym ireversibilně degraduje rostlinné fytohormony cytokininy. Dále jsou shrnuty obecné poznatky o methylotropní kvasince Pichia pastoris, která je používána jako expresní systém kvůli významné extracelulární expresi proteinů. Náplní experimentální části byla amplifikace genu NsCKX pomocí PCR, klonování do vektoru pTYB12/pGAPZalfaA a transformování do E. coli. Vzniklý rekombinantní plasmid pGAPZalfaA::NsCKX byl použit pro expresi v Pichia pastoris. Enzymová aktivita se však nepodařila naměřit. Protein byl také podroben SDS-PAGE elektroforéze, výsledky však nebyly přesné.This thesis deals with a preparation of mutated cytokinin dehydrogenase from the cyanobacterium Nostoc PCC 7120 with a mutation in the active site. The main focus of the theoretical part are cyanobacteria, the globally widespread gram-negative eubacteria and possible ancestors of plant chloroplasts. They can assimilate photosynthetically and fix atmospheric nitrogen. Cyanobacterium Nostoc PCC 7120 has a gene coding for cytokinin dehydrogenase (CKX), an enzyme irreversibly degrading plant phytohormones cytokinins. Further there is a summary of informations about methylotropic yeast Pichia pastoris that is used as an expression system due to its significant extracellular expression of proteins. During the experimental part an amplification of NsCKX gene by PCR was carried. Then the gene was cloned into pTYB12/pGAPZalphaA vector and transformed into E. coli. Recombinant plasmid pGAPZalphaA::NsCKX was subsequently used for the expression in Pichia pastoris. However, no CKX activity was detected. The protein was also analalyzed by SDS-PAGE but results were not accurate.

Number of the records: 1  

  This site uses cookies to make them easier to browse. Learn more about how we use cookies.