Šanovcová, Klára,
Explantátové kultury konopí setého (Cannabis sativa L.) [rukopis] / Klára Šanovcová. -- 2023. -- 82 s. (96 415 znaků). -- Oponent Karel Doležal. -- Ved. práce Ludmila Ohnoutková. -- Abstrakt: Konopí seté (Cannabis sativa L.) je jednoletá olejnina čeledi konopovité (Cannabaceae). Má široké využití v průmyslu, medicíně i zemědělství. Obsahuje množství významných látek, z nichž nejznámější jsou 9-tetrahydrokanabinol (THC), kanabidiol (CBD) a kanabichromen (CBC). V rámci diplomové práce byla stanovena účinná sterilizace explantátů, které jsou odvozeny ze zralých a nezralých semen. Bylo stanoveno médium vhodné pro indukci kalusů i pro organogenezi z apikálního meristému. Pomocí Agrobacterium tumefaciens byla provedena transformace různých explantátů dvou odrůd, Finola a USO-31. Expresní vektor pGGG obsahoval reportérový gen GUS a selekční gen nptII, součástí druhého vektoru pLx byl reportérový gen eGFP a selekční gen nptII, a navíc tento vektor obsahoval transkripční faktory. Optimální koncentrace kanamycinu pro selekci byla u obou odrůd 100 mg/l. U transformovaných pletiv byla po 7 a 8 týdnech kultivace zjištěna exprese reportérových genů GUS a eGFP. Stabilní transgenní rostliny nebyly získány.. -- Abstrakt: Cannabis sativa L. is an annual oilseed herb belonging to the Cannabaceae family. It is widely used in industry, medicine and agriculture. It contains lots of secondary metabolites, wich 9-tetrahydrocannabinol (THC), cannabidiol (CBD) and cannabichromene (CBC) are the most common. As part of the diploma thesis, the effective sterilization method of explants from mature and immature seeds was found. A medium for callus induction and organogenesis from the apical meristem was tested. Several types of explants of two cultivars, Finola and USO-31, were transformed using Agrobacterium tumefaciens harboring one of two expression vectors. The expression vector pGGG contained the reporter gene GUS and the selection gene nptII; the second vector, pLx, contained the reporter gene eGFP, the selection gene nptII, and in addition transcription factors. The optimal concentration of kanamycin for selection was 100 mg/l for both varieties. Expression of the GUS and eGFP reporter genes was detected in the transformed tissues after 7 and 8 weeks of cultivation. Stable transgenic plants were not obtained.
Doležal, Karel. Ohnoutková, Ludmila. Laboratoř růstových regulátorů
Cannabis sativa L.. explantátové kultury. transformace. Agrobacterium tumefaciens. Cannabis sativa L.. in vitro culture. transformation. Agrobacterium tumefaciens. diplomové práce
(043)378.2