Počet záznamů: 1
Příprava a charakterizace buněčného modelu Diamondovy-Blackfanovy anémie
Údaje o názvu Příprava a charakterizace buněčného modelu Diamondovy-Blackfanovy anémie [rukopis] / Ondřej Jahoda Další variantní názvy Příprava a charakterizace buněčného modelu Diamondovy-Blackfanovy anémie Osobní jméno Jahoda, Ondřej, (autor diplomové práce nebo disertace) Překl.náz Creation and characterization of cellular model of Diamond-Blackfan anemia Vyd.údaje 2019 Fyz.popis ix; 55; (14 852 znaků) : tab. + CD ROM Poznámka Oponent Lucie Láníková Ved. práce Katarína Kapraľová Dal.odpovědnost Láníková, Lucie, (oponent) Kapraľová, Katarína, (vedoucí diplomové práce nebo disertace) Dal.odpovědnost Univerzita Palackého. Katedra buněčné biologie a genetiky (udelovatel akademické hodnosti) Klíč.slova erytropoéza * Diamondova-Blackfanova anémie * buněčný model * CRISPR/Cas9 * erythropoiesis * Diamond-Blackfan anemia * cellular model * CRISPR/Cas9 Forma, žánr diplomové práce master's theses MDT (043)378.2 Země vyd. Česko Jazyk dok. čeština Druh dok. PUBLIKAČNÍ ČINNOST Titul Mgr. Studijní program Navazující Studijní program Biologie Studijní obor Molekulární a buněčná biologie kniha
Kvalifikační práce Staženo Velikost datum zpřístupnění 00225546-452099053.pdf 86 1.5 MB 03.05.2019 Posudek Typ posudku 00225546-ved-936668540.pdf Posudek vedoucího 00225546-opon-926649547.pdf Posudek oponenta
Předložená diplomová práce je zaměřena na přípravu buněčného modelu Diamondovy-Blackfanovy anémie pomocí technologie CRISPR/Cas9 a jeho následnou charakterizaci. V teoretické části je popsán proces erytropoézy s zdůrazem na rozvoj anémie při jeho narušení. Dále je v této části stručně charakterizována Diamondova-Blackfanova anémie. Cílem experimentální části práce bylo vytvořit cílené delece v genu RPS19 v myší erytroleukemické buněčné linií (MEL) pomocí CRISPR/Cas9 technologie a následně u připravených mutovaných linií otestovat vliv jednotlivých mutací na buněčnou proliferaci a hladinu exprese mutovaného genu. Získané výsledky ukázaly všeobecné snížení proliferačního potenciálu u všech připravených testovaných mutantních linií. Exprese mutovaného genu na úrovni transkripce do mRNA byla snížena u dvou ze tří testovaných mutantních klonů. Připravené buněčné linie vykazovali znaky přítomné u DBA pacientů a po další charakterizaci mohou být využity ke studiu DBA patofyziologie.The presented diploma thesis is focused on production of cellular model of Diamond-Blackfan anemia using CRISPR/Cas9 technology and its subsequent characterization. The first part is theoretical background and describes the process of erythropoiesis, the development of anemia by disruption of erythropoiesis and a brief characterization of Diamond-Blackfan anemia. The aim of the experimental part was to generate targeted deletions of the RPS19 gene in murine erythroleukemia cell line (MEL) using CRISPR/Cas9 technology and subsequently to test the effect of these mutations on the cell proliferation and expression level of the mutated gene. The results showed a decreased cell proliferation potential in all tested mutant cell lines. The expression of mutated gene at the mRNA transcription level was reduced in two of the three tested mutant clones. Prepared mutated cell lines showed the features presented in DBA patients and after further characterization could be used for studying the DBA pathophysiology.
Počet záznamů: 1