Tato diplomová práce se zabývá optimalizací a využitím nové ambientní ionizační techniky r-DUV-LAESCI-MS/MSI pro analýzu organických látek. Předmětem teoretické části je seznámení čtenáře s ambientní hmotnostní spektrometrií, představení r-DUV-LAESCI-MS/MSI a detailní popis využívané instrumentace. Teoretickou část uzavírá rešerše dosavadních článků zabývajících se využitím LAESI-MS/MSI a LAAPPI-MS/MSI v analýze organických molekul. V druhé polovině diplomové práce navazuje experimentální část, která se zaměřuje na optimalizaci r-DUV-LAESCI-MS/MSI, a to konkrétně průtoku a typů sprejovacích kapalin ("sheath liquid") využívaných v duálním iontovém zdroji ESCI, testování vlivu typu povrchů na intenzitu signálu polárních i nepolárních analytů s různou molekulovou hmotností a v neposlední řadě i optimalizaci vysokorychlostního hmotnostního zobrazování. Závěrem této diplomové práce je detailní vyhodnocení naměřených dat v podobě četných grafů a tabulek, prezentování získaných 2D obrázků z hmotnostního zobrazování a také rozsáhlá diskuse nad danou problematikou, získanými výsledky a také potenciálem této techniky do budoucna.This master's thesis is about the optimization and use of a new ambient ionization technique r-DUV-LAESCI-MS/MSI for the analysis of organic compounds. The theoretical part describes ambient mass spectrometry, introduces r-DUV-LAESCI-MS and provides a detailed description of its instrumentation. The theoretical part concludes with a review of existing articles dealing with the use of LAESI-MS/MSI and LAAPPI-MS/MSI in the analysis of organic compounds. The second half of the thesis is followed by the experimental part, which focuses on the optimization of r-DUV-LAESCI-MS/MSI, specifically the flow rate and types of sheath liquids used in the dual ion source ESCI, testing the effect of different surface materials on the signal intensity of polar and non-polar analytes with different molecular weights and also optimization of high-speed imaging. The conclusion of this thesis presents a detailed evaluation of the measured data in the form of numerous graphs and tables, as well as the presentation of obtained 2D images from mass spectrometry imaging. It also includes an extensive discussion of the subject, the obtained results, and the potential of this technique for future applications.