Bakalářská práce je zaměřena na optimalizaci protokolů extrakce a izolace u vybraných fytohormonálních skupin, konkrétně cytokininů, auxinů a kyseliny abscisové. Extrakční a purifikační protokoly byly studovány z hlediska vybraných parametrů, které mohou ovlivňovat výsledek stanovení rostlinných hormonů (např. extrakční objem, složení extrakčních činidel). Dále byla porovnávána konvenční metoda extrakce na pevné fázi s inovativním disperzivním uspořádáním. Pro stanovení fytohormonů byla použita ultra-vysokoúčinná kapalinová chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií (UHPLC-MS/MS) a získané výsledky byly hodnoceny z hlediska celkového profilu výše uvedených fytohormonálních skupin. Na základě získaných výsledků byl vyhotoven optimalizovaný protokol extrakce a izolace vybraných rostlinných hormonů pro rutinní práce v laboratoři.The bachelor thesis is focused on optimization of extraction and isolation of selected phytohormonal groups, namely cytokinins, auxins, and abscisic acid. Extraction and purification protocols have been studied for selected parameters (e.g., extraction volume, extraction solvent composition) that may influence the results of plant hormone determination. Furthermore, conventional solid-phase extraction was compared with an innovative dispersive approach. For the determination of phytohormones, ultra-high performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry (UHPLC-MS/MS) was used and the results were evaluated for the overall phytohormone profiles. Based on the results, an optimized protocol for extraction and isolation of selected plant hormones was prepared for routine work in the laboratory.