Počet záznamů: 1
Štúdium aktivácie signálnych dráh imunitného systému včely medonosnej
Údaje o názvu Štúdium aktivácie signálnych dráh imunitného systému včely medonosnej [rukopis] / Gabriela Hofericová Další variantní názvy Štúdium aktivácie signálnych dráh imunitného systému včely medonosnej Osobní jméno Hofericová, Gabriela, (autor diplomové práce nebo disertace) Překl.náz Study of the activation of signaling pathways of the honey bee immune system Vyd.údaje 2024 Fyz.popis 95 s. (164 568 znakov) : il., grafy, schémata, tab. Poznámka Ved. práce Silvie Dostálková Oponent Marek Ratvaj Dal.odpovědnost Dostálková, Silvie (vedoucí diplomové práce nebo disertace) Ratvaj, Marek, (oponent) Dal.odpovědnost Univerzita Palackého. Katedra biochemie (udelovatel akademické hodnosti) Klíč.slova včela medonosná * humorálna imunita * signálne dráhy * antimikrobiálne peptidy * génová expresia * honey bee * humoral immunity * signaling pathways * antimicrobial peptides * gene expression Forma, žánr diplomové práce master's theses MDT (043)378.2 Země vyd. Česko Jazyk dok. slovenština Druh dok. PUBLIKAČNÍ ČINNOST Titul Mgr. Studijní program Navazující Studijní program Biochemie Studijní obor Biochemie kniha
Kvalifikační práce Staženo Velikost datum zpřístupnění 00286662-127295661.pdf 0 4.2 MB 22.04.2024 Posudek Typ posudku 00286662-ved-554093463.pdf Posudek vedoucího 00286662-opon-956737405.pdf Posudek oponenta Průběh obhajoby datum zadání datum odevzdání datum obhajoby přidělená hodnocení typ hodnocení 00286662-prubeh-887993036.pdf 21.02.2022 22.04.2024 21.05.2024 A Hodnocení známkou
Imunitné obranné mechanizmy sú regulované intracelulárnymi signálnymi dráhami. U včely medonosnej (Apis mellifera) kódujú gény prítomné v genóme komponenty 4 signálnych dráh: Toll, Imd, JAK/STAT a JNK. Dráhy Toll a Imd vedú k syntéze antimikrobiálnych peptidov, ktoré sa produkujú v tukovom teliesku a uvoľňujú do hemolymfy v reakcii na rôzne infekcie. Grampozitívne baktérie a huby aktivujú signálnu dráhu Toll. Signálna dráha Imd je spustená gramnegatívnymi a niektorými druhmi grampozitívnych baktérií, u ktorých je hlavnou zložkou bunkovej steny peptidoglykán typu kyseliny diaminopimelovej. V rámci diplomovej práce bola analyzovaná imunitná odpoveď a aktivácia signálnych dráh (Toll, Imd, JAK/STAT) na úrovni génovej expresie u letných včiel imunizovaných zmesou tepelne inaktivovaných grampozitívnych a gramnegatívnych baktérií s koncentráciou 10^7 CFUml-1 a včiel imunizovaných podaním kŕmneho roztoku obsahujúceho lipopolysacharidy (LPS) o koncentrácií 60 gml-1. U včiel kŕmených zmesou inaktivovaných baktérii nebola v porovnaní s kontrolnou skupinou včiel pozorovaná zmena expresie génov pre antimikrobiálne peptidy (apidaecín, defenzín 1 a hymenoptaecín), na základe čoho bola imunizácia včiel baktériami vyhodnotená ako nedostatočná. Zmena génovej expresie nebola zaznamenaná ani na úrovni signálnej dráhy Toll. U včiel kŕmených LPS bola detegovaná zvýšená expresia génov pre antimikrobiálne peptidy (abaecín, apidaecín a defenzín 1). Množstvo abaecínu, defenzínu 1 a hymenoptaecínu bolo merané aj na úrovni ELISA metódy, kde však nebol oproti kontrolnej skupine pozorovaný významný rozdiel. Zaznamenaný bol aj nárast expresie génov pre signálne dráhy, konkrétne sa jednalo o gény kódujúce transkripčný faktor Dorsal, proteín rozpoznávajúci peptidoglykány PGRP-S1 a adaptorový proteín Imd. Na druhej strane, expresia génov kódujúcich kaspázu Dredd, transkripčný faktor Relish a proteíny PGRP-LC, MyD88-A, Hopscotch a STAT92E, bola u imunizovaných včiel oproti kontrole znížená. Na základe získaných výsledkov bolo potvrdené zapojenie dráhy Toll a Imd do aktivácie humorálnej imunity. Aktivácia dráhy JAK/STAT nebola preukázaná. Analyzovaný bol taktiež vplyv odstránenia tráviacej sústavy zo vzoriek na zmenu expresie génov pre antimikrobiálne peptidy u včiel kŕmených LPS. Detegované bolo zvýšenie génovej expresie pre apidaecín a defenzín 1 u analyzovaných skupín oproti kontrolným včelám s tráviacou sústavou. Výsledky získané v rámci diplomovej práce môžu spolu s komplexnejšou analýzou aktivácie signálnych dráh včely medonosnej prispieť k lepšiemu pochopeniu mechanizmov fungovania jej imunitného systému.Immune defense mechanisms are regulated by intracellular signaling pathways. In the honey bee (Apis mellifera), genes present in the genome encode components of 4 signaling pathways: Toll, Imd, JAK/STAT and JNK. The Toll and Imd pathways lead to the synthesis of antimicrobial peptides that are produced and released into the hemolymph in response to various infections. Gram-positive bacteria and fungi activate the Toll signaling pathway. The Imd signaling pathway is triggered by Gram negative and some Gram-positive bacteria in which a diaminopimelic acid type peptidoglycan is a major component of the cell wall. In this thesis, the immune response and activation of immune signaling pathways (Toll, Imd, JAK/STAT) at the relative gene expression level were analyzed in summer bees immunized with a mixture of heat-inactivated Gram-positive and Gram-negative bacteria at a concentration of 107 CFUml-1 and bees immunized with a feeding solution containing lipopolysaccharides (LPS) at a concentration of 60 gml-1. In bees fed with mixture of inactivated bacteria, no change in the expression of genes encoding antimicrobial peptides (apidaecin, defensin 1 and hymenoptaecin) was observed in comparison to the control group of bees. Based on this, the immunization of bees by feeding with heat inactivated bacteria was evaluated as insufficient. Changes in gene expression was not detected at the level of the Toll signaling pathway within this experimental group. Higher expression of genes for antimicrobial peptides (abaecin, apidaecin and defensin 1) in comparison to control group was detected in bees fed with LPS. The amount of abaecin, hymenoptaecin and defensin 1 in this group was also analyzed at the tissue level by ELISA method, however, no significant difference was observed compared to the control group. The upregulation of genes for signaling pathways encoding the transcription factor Dorsal, the peptidoglycan recognition protein PGRP-S1 and the adaptor protein Imd, was detected in bees fed with LPS. On the other hand, the expression of genes encoding the caspase Dredd, the transcription factor Relish, and the proteins PGRP-LC, MyD88-A, Hopscotch, and STAT92E, was downregulated in immunized bees compared to the control group. Based on the obtained results, the involvement of the Toll and Imd pathways in the activation of humoral immunity was confirmed. However, activation of the JAK/STAT pathway was not observed at the relative gene expression level within this study. The influence of the digestive system removal on the change of relative gene expression for antimicrobial peptides in bees fed with LPS was also analysed. The upregulation of apidaecin and defensin 1 gene expression was detected in analyzed samples compared to the control group with digestive system. The results obtained in this thesis, together with a more comprehensive analysis of the activation of signaling pathways in the honey bee, may contribute to a better understanding of the mechanisms of the functioning of honey bee immune system.
Počet záznamů: 1