Počet záznamů: 1
Studium tří rodin aldehyddehydrogenas z mechu (Physcomitrella patens)
Údaje o názvu Studium tří rodin aldehyddehydrogenas z mechu (Physcomitrella patens) [rukopis] / Jan Vilím Další variantní názvy Studium tří rodin aldehyddehydrogenas z mechu (Physcomitrella patens) Osobní jméno Vilím, Jan (autor diplomové práce nebo disertace) Překl.náz Study on three aldehyde dehydrogenase families from moss (Physcomitrella patens) Vyd.údaje 2015 Fyz.popis 68 + CD-ROM Poznámka Oponent Marek Petřivalský Ved. práce Martina Tylichová Dal.odpovědnost Petřivalský, Marek, 1969- (oponent) Tylichová, Martina (vedoucí diplomové práce nebo disertace) Dal.odpovědnost Univerzita Palackého. Katedra biochemie (udelovatel akademické hodnosti) Klíč.slova aldehyddehydrogenasa * mech * purifikace * enzymová kinetika * krystalizace * aldehyde dehydrogenase * moss * purification * enzyme kinetics * crystallization Forma, žánr diplomové práce master's theses MDT (043)378.2 Země vyd. Česko Jazyk dok. angličtina Druh dok. PUBLIKAČNÍ ČINNOST Titul Mgr. Studijní program Navazující Studijní program Biochemie Studijní obor Biochemie kniha
Kvalifikační práce Staženo Velikost datum zpřístupnění 00187848-813003852.pdf 36 1.4 MB 30.04.2015 Posudek Typ posudku 00187848-ved-444161548.pdf Posudek vedoucího 00187848-opon-811453697.pdf Posudek oponenta Průběh obhajoby datum zadání datum odevzdání datum obhajoby přidělená hodnocení typ hodnocení 00187848-prubeh-228445616.docx 01.09.2011 30.04.2015 25.05.2015 1 Hodnocení známkou Signatura Čár.kód Lokace Dislokace Info DP-KBC/238 (PřF-KBO) 3134517950 PřF-Holice PřF, Knihovna Holice - sklad pouze prezenčně
Byla vypracovana literarni reserse shrnující poznatky o mechu Physcomitrella patens a nadrodině aldehyddehydrogenas. Byla izolována RNA, která byla následně přepsána do cDNA a bylo provedeno klonování PpALDH10, PpALDH12 a PpALDH21. Rekombinantní enzymy byly produkovány v expresních buňkách Escherichia coli. Při nedostatečné produkci byla provedena optimalizace volbou vektoru a odstraněním signální sekvence. Tyto změny umožnily dvou krokovou purifikaci enzymů a jejich následnou molekulární a biochemickou charakterizaci. Mezi stanovované vlastností patří oligomerizační status, pH optimum, termostabilita, substrátová specificita a kinetické parametry. Nakonec byly krystalovány dvě zkoumáné PpALDH a byla získána rentgenostrukturní data pro PpALDH21 při rozlišení až 2.8?.Theoretical part summarizes known data related to a moss Physcomitrella patens and aldehyde dehydrogenase (ALDH) superfamily. Practical part deals with cDNA preparation and cloning of three ALDH genes from Physcomitrella, namely PpALDH10, PpALDH12 and PpALDH21. Recombinant enzymes were produced in Escherichia coli expression cells. To counter very low production of the first two ALDHs, optimization was performed by modifying putative signal sequences and used vector. These changes allowed for two-step purification and further the molecular and biochemical characterization of all three PpALDHs. Oligomerization state, pH optimum, thermostability, substrate specificity and kinetic parameters were determined. Finally, two studied PpALDHs were crystallized and X-ray diffraction data for PpALDH21 were collected up to 2.8 ? resolution.
Počet záznamů: 1