Předložená disertační práce se zabývá novými přístupy v analýze biologicky aktivních látek kapilární elektroforézou. Teoretická část je věnována kapilární elektroforéze, základním operačním módům a možnostem zvýšení citlivosti detekce. Dále jsou zde popsány chirální separace v kapilární elektroforéze, včetně běžně používaných chirálních selektorů. Teoretickou část uzavírá kapitola zabývající se urychlením separací v kapilární elektroforéze. Zde je kladen důraz na použití spojených kapilár, které jsou podrobněji studovány v experimentální části. První část práce se věnuje vývoji metody pro stanovení velmi malých koncentrací enantiomerů oxaliplatiny. Optimalizace podmínek probíhala pomocí kapilární elektroforézy vybavené detektorem s diodovým polem a zahrnovala volbu složení, pH a koncentrace základního elektrolytu, volbu a koncentraci použitého chirálního selektoru a přídavek různých aditiv do základního elektrolytu. Pro citlivou a specifickou detekci byla následně použita kapilární elektroforéza spojená s hmotnostní spektrometrií s indukčně vázaným plazmatem. Nakonec byla tato metoda úspěšně použita pro detekci enantiomerů oxaliplatiny v reálných vzorcích moči. Další část práce se zabývá vývojem rychlé metody separace enantiomerů pomocí spojení kapilár s různými vnitřními průměry. (R,S)-1,1'-binaftalen-2,2'-diyl hydrogenfosfát byl vybrán jako modelový analyt pro chirální separaci pomocí isopropylkarbamát cyklofruktanu 6. Cílem této práce nebylo zlepšit samotnou separaci, ale docílit zrychlení separace enantiomerů za použití spojených kapilár. Oproti běžné analýze v 50 ?m kapiláře, spojená kapilára umožnila dosáhnout výrazného zrychlení chirální separace s rozlišením vyšším než 1,5. Výsledky práce také zahrnují studium a validaci metody pro rychlé stanovení kyseliny orotové ve vzorcích neošetřené moči.The dissertation thesis is focused on new approaches in the analysis of biologically active substances by capillary electrophoresis. The theoretical part is devoted to the basics of capillary electrophoresis, the most common operating modes and possibilities of increasing a sensitivity of detection. Further, chiral separations in capillary electrophoresis are described, including commonly used chiral selectors. The theoretical part is finished by the chapter dealing with acceleration of separation in capillary electrophoresis. Here, the emphasis is placed on using a combination of two capillaries with different internal diameters, which is studied in more detail in the experimental part. The first part of the thesis deals with the development of a method for sensitive determination of oxaliplatin enantiomers. The conditions were optimized by capillary electrophoresis equipped with a diode array detector. The optimization included selection of the composition, pH and concentration of background electrolyte, type and concentration of the chiral selector, and addition of various additives to the background electrolyte. A combination of capillary electrophoresis and inductively coupled plasma mass spectrometry was subsequently used for sensitive and specific detection. Finally, this method was successfully used for detection of oxaliplatin enantiomers in real urine samples. The next part of the thesis deals with the development of fast separation method of enantiomers by combination of two capillaries with different internal diameters. (R,S)-1,1'-binaphthalene-2,2'-diyl hydrogenphosphate (R,S-BNP) was selected as a model analyte using isopropylcarbamate cyclofructan 6 (IP-CF6) as the chiral selector. The aim of this work was not to improve the separation itself but to show the possibility to accelerate the separation of enantiomers by connecting the capillaries. In comparison to the traditional analysis in a 50 ?m capillary, the connected capillaries allowed to achieve a significant acceleration of chiral separation with a resolution higher than 1.5. The results also included the development and validation of method for rapid determination of orotic acid in untreated urine samples.