Počet záznamů: 1
Štúdium vybraných proteínov ENT rodiny a ich úloha pri transporte cytokinínov
Údaje o názvu Štúdium vybraných proteínov ENT rodiny a ich úloha pri transporte cytokinínov [rukopis] / Martin Hudeček Další variantní názvy Štúdium vybraných proteínov ENT rodiny v Arabidopsis a ich úloha pri transporte cytokinínov Osobní jméno Hudeček, Martin, (autor diplomové práce nebo disertace) Překl.náz Study of selected Arabidopsis ENT family proteins and their role in the transport of cytokinins Vyd.údaje 2019 Fyz.popis 98 : grafy, schémata, tab. + Arabidopsis thaliana, cytokiníny, cytokinínový transport, ekvilibratívny nukleozidový transportér, ENT Poznámka Ved. práce Ondřej Plíhal Oponent Pavol Vadovič Dal.odpovědnost Plíhal, Ondřej (vedoucí diplomové práce nebo disertace) Vadovič, Pavol (oponent) Dal.odpovědnost Univerzita Palackého. Centrum regionu Haná (udelovatel akademické hodnosti) Forma, žánr diplomové práce master's theses MDT (043)378.2 Země vyd. Česko Jazyk dok. slovenština Druh dok. PUBLIKAČNÍ ČINNOST Titul Mgr. Studijní program Navazující Studijní program Biochemie Studijní obor Biotechnologie a genové inženýrství kniha
Kvalifikační práce Staženo Velikost datum zpřístupnění 00254383-524687838.pdf 57 3.1 MB 06.05.2019 Posudek Typ posudku 00254383-ved-545514140.pdf Posudek vedoucího 00254383-opon-561044740.pdf Posudek oponenta
Diplomová práca je zameraná na štúdium ekvilibratívnych nukleozidových transportérov a ich transportnej funkcie v modelovej rastline Arabidopsis thaliana. V teoretickej časti diplomovej práce bola vypracovaná literárna rešerš na tému cytokiníny so zameraním na biosyntézu, inaktiváciu a degradáciu, cytokinínový transport a distribúciu cytokinínov vo vakuolách. V praktickej časti boli pomocou GATEWAY technológie pripravené ENT expresné konštrukty (35S::GFP:ENT1, 35S::ENT1:GFP, 35S::GFP:ENT3, 35S::ENT3:GFP 35S::GFP:ENT6 a 35S::ENT6:GFP). Pomocou Agrobacterium tumefaciens, nesúceho príslušné konštrukty, boli transformované rastliny Nicotiana benthamiana a Arabidopsis thaliana. Pomocou konfokálnej laserovej skenovacej mikroskopie bola pozorovaná subcelulárna lokalizácia fúzneho proteínu ENT3 s N-terminálnou GFP značkou v listoch Nicotiana benthamiana. Bol preukázaný fenotyp T-DNA inzerčnej línie ent1 reagujúci na cytokiníny. Z T-DNA inzerčnej línie ent1 a divého typu boli izolované protoplasty a vakuoly. UHPLC-MS/MS analýzou obsahu cytokinínových foriem vo vakuolách ent1 a divého typu bola zistená transportná funkcia AtENT1, ktorý pravdepodobne plní funkciu vakuolárneho cytokinínového exportéru.The diploma thesis is focused on the study of equilibrative nucleoside transporters and their transport function in the model plant Arabidopsis thaliana. In the theoretical part of the diploma thesis, existing literature was reviewed on the topic of cytokinins, with a focus on biosynthesis, inactivation and degradation, cytokinin transport and cytokinin distribution in vacuoles. In the practical part, ENT expression constructs (35S::GFP:ENT1, 35S::ENT1:GFP, 35S::GFP:ENT3, 35S::ENT3:GFP 35S::GFP:ENT6 a 35S::ENT6:GFP) were prepared. Nicotiana benthamiana and Arabidopsis thaliana plants were transformed by Agrobacterium tumefaciens carrying these expression constructs. Using confocal laser scanning microscopy, the subcellular localization of the N-terminal GFP fusion ENT3 protein was followed in Nicotiana benthamiana leaves. The cytokinin-responsive phenotype of T-DNA insertion line ent1 was demonstrated. Protoplasts and vacuoles were isolated from the T-DNA insertion line ent1 and wild-type plants. UHPLC MS/MS analysis of cytokinin forms in ent1 and wild type vacuoles revealed AtENT1 transport function, which is likely to function as a vacuolar cytokinin exporter.
Počet záznamů: 1