Počet záznamů: 1  

Sodno-draselná ATPasa - exprese, purifikace a její interakce s malýi molekulami

  1. Údaje o názvuSodno-draselná ATPasa - exprese, purifikace a její interakce s malýi molekulami [rukopis] / Jaroslava Šeflová
    Další variantní názvyPříprava mutantů Na+/K+-ATPázy a jejich studium metodami fluorescenční spektroskopie
    Osobní jméno Geletičová, Jaroslava (autor diplomové práce nebo disertace)
    Překl.názThe preparation of the Na+/K+-ATPase mutants and their study using methods of fluorescence spectroscopy
    Vyd.údaje2017
    Fyz.popis177 : grafy, schémata, tab.
    PoznámkaVed. práce Martin Kubala
    Ved. práce Martin Kubala
    Dal.odpovědnost Kubala, Martin, 1977- (vedoucí diplomové práce nebo disertace)
    Kubala, Martin, 1977- (školitel)
    Dal.odpovědnost Univerzita Palackého. Katedra biofyziky (udelovatel akademické hodnosti)
    Klíč.slova sodno-draselná ATPasa * exprese v bakteriích * exprese v kvasinkách * C45 klička * C23 klička * Baginského metoda určení ATPasové aktivity * flavonolignany * halogenované chinolony * cisplatina * sodium-potassium ATPase * heterologous expression in bacteria * heterologous expression in yeast * C45 loop * C23 loop * Baginsky assay * flavonolignans * halogenated quinolones * cisplatin
    Forma, žánr disertace dissertations
    MDT (043.3)
    Země vyd.Česko
    Jazyk dok.angličtina
    Druh dok.PUBLIKAČNÍ ČINNOST
    TitulPh.D.
    Studijní programDoktorský
    Studijní programFyzika
    Studijní oborBiofyzika
    kniha

    kniha

    Kvalifikační práceStaženoVelikostdatum zpřístupnění
    00204101-783191784.pdf20851.6 MB21.09.2017
    PosudekTyp posudku
    00204101-ved-510099482.pdfPosudek vedoucího
    00204101-opon-770329587.pdfPosudek oponenta
    Průběh obhajobydatum zadánídatum odevzdánídatum obhajobypřidělená hodnocenítyp hodnocení
    00204101-prubeh-126863937.pdf01.09.200921.09.201711.01.2018S2

    Dizertační práce se zaměřuje na studium významného membránového proteinu, sodno-draselné pumpy. Tento enzym svou funkcí vytváří elektrochemický gradient, který je významný pro celou řadu buněčných procesů. V případě nesprávné funkce sodno-draselné ATPasy dochází ke vzniku patologických stavů, poruch a nemocí. Cílem této práce bylo studovat souvislosti mezi strukturou a funkcí toho proteinu s využitím dostupných experimentálních postupů. Příprava celé sodno-draselné pumpy byla provedena dvěma metodami - přímou izolací z tkáně a heterologní expresí v kvasinkách. Enzym izolovaný z prasečích ledvin byl použit pro zkoumání inhibice sodno-draselné pumpy po interakci s flavonolignany, halogenovanými chinolony a platinovými cytostatiky. Změna aktivity enzymu byla detekována pomocí modifikované Baginského metody, která určuje koncentraci fosfátu z hydrolýzy ATP. Dále byly heterologní expresí v bakteriích připraveny izolované cytoplasmatické segmenty proteinu (C45 a C23 kličky). Tyto kličky umožňují zkoumat interakci sodno-draselné pumpy a biologicky významných látek rozpustných ve vodných pufrech. Vybrané aktivní látky byly cílem dalšího výzkumu zaměřeného na odhalení vazebného místa a mechanismu inhibice enzymu.The Na+/K+-ATPase (NKA) is an essential membrane protein establishing electrochemical gradient used in cell processes. Dysfunction of NKA leads to pathological states and diseases. This thesis is focused on the relations between structure and function using available experimental approaches. Whole protein was prepared by two methods - direct isolation from porcine kidney and by heterologous expression in yeast. NKA isolated from porcine kidney was used for testing of biologically active molecules such as potential drugs (flavonolignans, halogenated hydroquinolones and platinum-based complexes). Furthermore, we studied the interactions of promising molecules inhibiting NKA activity using the modified Baginsky assay. Isolated cytoplasmic parts of the enzyme, represented by C23 and C45 loops, were used for determination of their binding site and for study of inhibitory mechanism.

Počet záznamů: 1  

  Tyto stránky využívají soubory cookies, které usnadňují jejich prohlížení. Další informace o tom jak používáme cookies.