V teoretické části diplomové práce byl popsán výskyt a zdroje antibiotik v životním prostředí, zejména ve vodách. Dále bylo v práci popsáno využití a účinky antibiotik a možná rezistence bakterií na antibiotika v různých prostředích. Další část diplomové práce se zaměřuje na popsání metod pro stanovení antibiotik v životním prostředí. V experimentální části diplomové práce je popsán materiál a metodika pro stanovení antibiotika ofloxacinu v modelových a reálných vzorcích vody. Pro separaci a identifikaci antibiotika ofloxacinu byl využit UHPLC systém ve spojení s hmotnostním spektrometrem. Parametry ionizace a hmotnostně spektrometrické detekce analytů byly optimalizovány. Validační studie dokázaly, že celý postup poskytuje dostatečně přesné a správné výsledky.The theoretical part of the diploma thesis describes the occurrence and sources of antibiotics in the environment, especially in waters. Furthermore, the use and effects of antibiotics and the possible resistance of bacteria to antibiotics in various environments were described. Another part of the diploma thesis focuses on the description of methods for determination of antibiotics in the environment. The experimental part of the diploma thesis describes the material and methodology for determination of antibiotic ofloxacin in model and real water samples. The UHPLC system with a mass spectrometer was used to separate and identify the antibiotic ofloxacin. Parameters of ionization and mass spectrometric detection of analytes were optimized. Validation studies have shown that the entire procedure provides accurate and accurate results.