Nová metoda separace, identifikace a kvantifikace syntetických benzodiazepinů byla vyvinuta za použití nevodné kapilární elektroforézy ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií (NACE-ESI-MS/MS). Separace byla provedena ve 20 mM octanu amonném v acetonitrilu s přídavkem 100 mM kyseliny trifluoroctové s využitím postupného vícenásobného pokrytí kapiláry iontovými polymery vytvářejícího obrácený elektroosmotický tok. Vyvinutá metoda byla validována pro účely forenzní a klinicko-toxikologické analýzy syntetických benzodiazepinů v lidském séru po jednoduché extrakci z kapaliny do kapaliny. Získané meze stanovitelnosti pro metodu NACE-ESI-MS/MS se pohybují v rozmezí 1,5 ng/ml až 15 ng/ml. Pro stanovení hodnot rozdělovacích koeficientů syntetických benzodiazepinů byla vyvinuta a optimalizována metoda micelární elektrokinetické chromatografie se spektrofotometrickou detekcí (MEKC-DAD).A new method for the separation, identification and quantification of synthetic benzodiazepines was developer using non-aqueous capillary electrophoresis with tandem mass spectrometry (NACE-ESI-MS/MS). The separation was carried out in 20 mM ammonium acetate in acetonitrile with an addition of 100 mM trifluoroacetic acid, using a multiply surface modified capillary with ionic polymers, creating a reverse electroosmotic flow. The developed method was validated for the use in forensic and clinical toxicology analyses of synthetic benzodiazepines in human serum, following a simple liquid-liquid extraction. The acquired limits of detection for the NACE-ESI-MS/MS method range from 1.5 ng/ml to 15 ng/ml. A micellar electrokinetic chromatography with spectrophotometric detection (MEKC-DAD) method was developed and optimized for the determination of the partition coefficients of synthetic benzodiazepines.