Standardizovaný extrakt ze semen ostropestřce mariánského (Silybum marianum [L.] Gaertn, Asteraceae), nazývaný silymarin, je směsí nejméně 7 flavonolignanů a flavonoidu taxifolinu. Silymarin má chemoprotektivní účinky a je aktivní složkou řady fytopřípravků a doplňků stravy. Farmakologicky nejvíce studovaným flavonolignanem silymarinu je silybin, který je směsí dvou diastereomerů A a B v přibližném poměru 1:1. První část předkládané práce je zaměřena na sledování vlivu silybinu na aktivity různých forem cytochromu P450 (CYP), hlavního enzymu I. fáze metabolismu cizorodých látek. U těch forem CYP, kde byl prokázán významný pokles aktivity způsobený silybinem, byla stanovena IC50 a byl popsán mechanismus inhibice. V přítomnosti silybinu byly in vitro významně ovlivněny aktivity forem CYP1A2, 2C8, 2C9 a 3A4. Nejvýraznější inhibiční efekt silybinu se projevil na aktivitách CYP3A4 a CYP2C9 (IC50 49,8 ?mol/l a 34,1 ?mol/l). Inhibice aktivity CYP2C9 silybinem byla popsána jako nekompetitivní. V případě CYP3A4 probíhala inhibice kompetitivním mechanismem. V další části práce byly sledovány metabolické přeměny silybinu v podmínkách in vitro. Výsledky našich experimentů ukázaly, že silybin je O-demethylován jaterním enzymem I. fáze metabolismu cizorodých látek, CYP2C8. Metabolismus silybinu, v tomto případě jednotlivých diastereomerů silybinu A a B i směsi dvou diastereomerů (silybinu AB), za účasti enzymů II. fáze biotransformace, byl sledován po inkubaci s UDP glukuronosyltransferasami (UGT). HPLC analýzou s UV detekcí bylo prokázáno, že UGT přítomné jak v primární kultuře lidských hepatocytů, tak v lidské jaterní mikrosomální frakci metabolizují silybin za vzniku čtyř monoglukuronidů: silybin A 7 O-b-D-glukuronidu, silybin B 7-O-b-D-glukuronidu, silybin A-20-O-b-D-glukuronidu a silybin B 20-O-b-D-glukuronidu. Použitím lidských rekombinantních forem UDP glukuronosyltransferas byly identifikovány lidské formy UGT zodpovědné za vznik jednotlivých metabolitů. Rekombinantní UGT1A1, 1A3, 1A8, 1A10, ale také UGT1A6, 1A7, 1A9, 2B7 a 2B15 stereoselektivně a regioselektivně tvořily 7- a 20-O-b-D-monoglukuronidy silybinu. Rekombinantní UGT1A4, 2B4 a 2B17 se na glukuronidaci silybinu nepodílely. Bylo prokázáno, že UDP glukuronosyl-transferasy přednostně reagují s jedním ze dvou diastereomerů, a to se silybinem B. Preferovaným místem glukuronidace byl C7 uhlík molekuly silybinu. Poslední část práce se zabývala identifikací metabolitů vznikajících při biotransformaci silybinu v moči a plazmě dobrovolníků. Ve studii bylo nalezeno, že nejvýznamnější metabolity při biotransformaci silybinu jsou glukuronidy. Na rozdíl od lidské plazmy, kde jsme nalezli především silybin B-20 O b-D-glukuronid, jsme ve vzorcích lidské moči identifikovali pouze 7 O-b-D-glukuronidy silybinu. Produkt I. fáze biotransformace silybinu, O demethylovaný silybin, byl nalezen ve vzorcích moči i plazmy jako minoritní produkt ve formě O demethylovaného silybin glukuronidu.Silymarin, a standard extract from Silybum marianum L. seeds, contains at least 7 flavonolignans and flavonoid taxifolin. It has been used to date as chemoprotectant. Flavonolignan silybin, the main component of silymarin, is composed of two diastereomers A and B in approximately 1:1 ratio. In the first part of the presented work, inhibition of cytochromes P450 (CYP) by silybin in microsomal fraction was studied. The results of the inhibition of prototypic activities of individual human microsomal CYP enzymes by silybin revealed that there were four P450 activities influenced by the presence of this compound, namely, those of CYP1A2, 2C8, 2C9 and 3A4. The most prominent inhibition effect was found with CYP3A4 and CYP2C9 (IC50 49.8 ?mol/l and 34.1 ?mol/l, respectively). Our results indicated the presence of a noncompetitive inhibition of the CYP2C9 activity and of a competitive inhibition of the CYP3A4 activity. In the next part of this work the metabolism of silybin in vitro was observed. The results presented here showed that silybin is subjected to O-demethylation by cytochromes P450, enzymes of the Phase I of xenobiotic metabolism. Experiments with bactosomes confirmed that it is the CYP2C8 form which is responsible for formation of the O-demethylated silybin. Contribution of UDP-glucuronosyltransferases (main phase II enzymes) to metabolism of silybin and its A and B diastereomers was also investigated. Four main metabolites of silybin formed by UGTs were identified using HPLC with UV detection. Hepatocytes and microsomes formed silybin A-7-O-?-D-glucuronide, B-7-O-?-D-glucuronide, A-20-O-?-D-glucuronide and B-20-O-?-D-glucuronide. With recombinant UGTs, it was confirmed that mainly the UGT1A1, 1A3, 1A8 and 1A10 enzymes, but also UGT1A6, 1A7, 1A9, 2B7 and 2B15 were responsible for the stereoselective and regioselective reactions leading to the respective silybin glucuronides. No silybin glucuronides were generated by UGT1A4, 2B4 and 2B17. The preferential glucuronidation of silybin B under in vitro conditions by human UGTs was confirmed. The phenolic ?OH group at C7 position of silybin structure was the main site of glucuronidation. The last part of this work was focused on the identification of silybin metabolites in human plasma and urine samples. Monoglucuronides of silybin were found as the main metabolites in the plasma and urine. The human in vivo samples yielded the 7-O-b-D-glucuronides of the A and B diastereomers both in the plasma and urine. In human plasma, moreover, the presence of silybin B-20-O-b-D-glucuronide was also confirmed. The glucuronide of the O-demethylated silybin was found as minor metabolite in plasma and urine samples.