Tato práce byla zaměřena na zavedení a hodnocení metod in vitro založených na buněčných a tkáňových kulturách pro zkoušení kožní/oční dráždivosti a fototoxicity.Studie kožní dráždivosti 25 chemických látek, zkoušených s využitím modelu kůže EpiDermTM v optimalizovaném protokolu a ve skupině dobrovolníků (4HPT), odhalila, že modely tvořené lidskými buňkami mohou být užitečnější pro predikci hazardu kožní dráždivosti pro člověka než konvenční Draizova zkouška na králících. Tyto výsledky přispěly ke změnám v seznamu referenčních standardních látek, vydanému ECVAM, a byly zahrnuty do návrhu nového metodického pokynu OECD týkajícího se kožní dráždivosti. Pomocí baterie metod byl hodnocen potenciál oční dráždivosti oftalmologických přípravků, kosmetických prostředků a chemických látek se známými údaji o jejich potenciálu kožní dráždivosti. Výsledky této studie přispěly ke specifikaci oblasti použití a omezení jednotlivých metod.Tato práce zahrnovala také hodnocení fototoxických účinků bergamotových a jiných éterických olejů. Strategie postupného zkoušení se skládala z chemické analýzy, zkoušek fototoxicity in vitro 3T3 NRU PT a zkoušky na modelu lidské kůže EpiDermTM. Negativní výsledky nebo nejvyšší nefototoxické koncetrace získané s pomocí modelu kůže byly potvrzeny ve zkoušce fototoxicity ve skupině dobrovolníků. Fototoxicita éterických olejů byla závislá na obsahu fotoaktivních složek a na použitém rozpouštědle. Zkouška fototoxicity s využitím modelu lidské kůže je důležitým nástrojem pro volbu počátečních koncentrací použitých v konfirmačních testech na lidech, ale pro extrapolaci je nutné zařadit bezpečnostní faktor 10.Zkoušky fototoxicity a kožní dráždivosti in vitro byly také použity při vývoji a syntéze nových UV filtrů a vedly ke vzniku nového, širokospektrálního UV absorbéru bez negativních účinků na zdraví.This work was focused on implementation and evaluation of in vitro methods based on cell and tissue cultures for testing skin / eye irritation and phototoxicity. A study on skin irritation of 25 chemicals, using skin model EpiDermTM with optimized protocol and 4h human patch test (4HPT) revealed, that in vitro models derived from human skin cells might be more useful for the prediction of human skin irritation hazard than conventional Draize test on rabbits. These results contributed to amendments of the list of reference standard chemicals issued by ECVAM and included in draft OECD Test Guideline on skin irritation.Eye irritation of ophtalmologic preparations, cosmetic products and chemicals with known skin irritation potential was assessed using a battery of in vitro methods. The results of this study contributed to the specification of applicability domain and revealed limitations of individual methods. This work included evaluation of phototoxicity potential of bergamot and other essential oils. The applied tiered testing strategy involved chemical analysis, in vitro 3T3 NRU Phototoxicity Test and the EpiDerm? Skin Phototoxicity Assay. The negative results or the first non-phototoxic concentrations determined by the skin model were confirmed in vivo by means of human skin photopatch test. The phototoxicity of the essential oils was dependent on the content of photoactive substances and the solvent used. The human skin model test proved to be a useful tool for consideration of initial concentrations for confirmatory human photopatch tests, however, a safety factor of 10 has to be considered for extrapolation. The in vitro tests for phototoxicity and skin irritation were also used during the development and synthesis of new UV filters, resulting in a novel broad-spectrum UV absorber with no adverse health effects.