Chronická myeloidní leukemie je myeloproliferativní onemocnění charakteristické přítomností Filadelfského chromosomu, který vzniká translokací chromosomu 9 a 22. Nově vzniklý gen BCR/ABL má za následek produkci proteinu p210, konstitutivně aktivní tyrosinkinasy zapříčiňující vznik choroby. Její léčba je v současnosti úspěšná díky nově vyvinutým lékům založených na selektivní inhibici těchto tyrosinkinas. Imatinib poskytuje velmi dobrou hematologickou, cytogenetickou a molekulární odpověď, ale znevýhodňuje jej možný vznik rezistence. Monitorování hladin léku v tělních tekutinách má důležitý význam především u pacientů se špatnou odpovědí na léčbu, u nichž se na základě plasmatických hladin upravuje dávkování IM. Dále pak u pacientů se špatnou snášenlivostí léku, u nichž se snižuje dávkování v případě vysokých hladin imatinibu. Cílem této práce je vyvinout novou, rychlou a citlivou LC/MSMS metodu pro stanovení plasmatické hladiny imatinibu založenou na isotopovém zřeďování deuterovaným standardem. Byla vyvinuta separační metoda na principu reverzní fáze využívající ultraúčinné kapalinové chromatografie za vysokých tlaků o celkové době analýzy 3,2 min. Pro detekci byl použit trojitý kvadrupolový analyzátor s ionizací elektrosprejem v pozitivním módu v režimu "multiple reaction monitoring". Dále byla vyvinuta metoda přímého nástřiku bez použití separace, která poskytuje významně rychlejší stanovení avšak s nižší citlivostí. Metody byly validovány a následně aplikovány na stanovení imatinibu v krevní plasmě pacientů trpících chronickou myeloidní leukémií na terapii imatinibem. Vyvinuté metody poskytují dostatečnou správnost a přesnost pro rutinní stanovení imatinibu v plasmě a byly zavedeny do rutinní praxe v Laboratoři dědičných metabolických poruch, Oddělení klinické biochemie, Fakultní nemocnice Olomouc.Chronic myeloid leukemia is a myeloproliferative disease characterized by presence of Philadelphia chromosome rising by translocation of chromosome 9 and 22. The production of protein p210 (a tyrosine kinase) is a consequence of the new gene BCR/ABL. Recently, the treatment is very successful because of newly developed drugs based on selective inhibition of these tyrosine kinases. Imatinib provides very good hematologic, cytogenetic and molecular response. Drug monitoring in body fluids is significant in patients with poor response to treatment; dosage of the drug is modified according to its plasmatic levels. Furthermore, it is significant in patients with poor toleration of the drug; in case of high plasmatic levels the dosage is reduced. The aim of this study is to develop a fast and sensitive LC/MSMS method for imatinib plasmatic levels determination based on isotopic dilution by a deuterated standard. A separation method founded on reverse phase using ultra high performance liquid chromatography with total run time of 3.2 min was developed. A triple quadrupole with electrospray ionization in positive mode and multiple reaction monitoring mode was used for detection. Furthermore, a flow injection analysis was developed, which provides significantly faster determination but with less sensitivity. Methods were validated and subsequently applicated on plasma of patients with chronic myeloid leukemia on imatinib treatment. Developed methods provide sufficient accuracy and precision for routine determination of imatinib in plasma and they were established to routine practice in Laboratory of inherited metabolic disorders, University Hospital Olomouc.