Předložená diplomová práce se zabývá problematikou srovnání různých způsobů vyhodnocení testů cytotoxické aktivity u nádorových linií. Teoretická část je věnována přehledu v současnosti používaných chemoterapeutik, preklinickému hodnocení lékové odpovědi, buněčné odpovědi na léčiva a in vitro metodám testování buněčné odpovědi. Dále je zařazena i stručná charakteristika použitých testovacích látek. Náplní experimentální části bylo studium aktivity 5-fluorouracilu a nokodazolu na zvolených buněčných modelech (linie HCT 116 a BxPC3) pomocí MTT eseje a barvení trypanovou modří ve dvou zvolených časech (po 48 a 72 hodinách). Ze stanovených hodnot IC50, relativních a frakčních viabilit vyplývá, že oba testy poskytují odlišné informace o cytotoxických vlastnostech testovacích látek. Pro získání nejpřesnějších výsledků a kompletního popisu stavu buněčné populace je tedy nejvhodnější kombinovat více metod pro stanovení cytotoxicity současně.The presented thesis deals with comparison of various methods of evaluation of cytotoxic activity tests in tumour cell lines. The theoretical part is devoted to the overview of currently used chemotherapeutics, preclinical evaluation of drug response, cellular responses to drugs and in vitro techniques for testing cellular response. A brief description of the test substances is also included. The aim of the experimental part of the diploma thesis was to study the activity of the test substances 5-fluorouracil and nocodazole on selected cell models (HCT 116 and BxPC3 cell lines) using the MTT assay and trypan blue exclusion test at two selected time points (after 48 and 72 hours). The obtained IC50 values, along with relative and fractional viabilities, indicate that the two assays provide different types of information regarding the cytotoxic properties of the tested substances. To obtain the most accurate results and a comprehensive description of the cell population, it is therefore most appropriate to combine multiple cytotoxicity assessment assays simultaneously.