Polyaminy reprezentují širokou skupinu alifatických molekul obsahujících dvě nebo více amino- skupin. Rozsah jejich přítomnosti je od mikrobů až po člověka a veškeré žijící organismy. Plní spoustu různých rolí - slouží hlavně jako důležité molekuly během biotického a abiotického stresu, jsou to stabilizátory pro chromatin atd. Nejdůležitějšími a také nejvíce studovanými polyaminy jsou putrescin, spermin a spermidin s nejvíce neprozkoumanými signálními dráhami. Naše práce se snaží stanovit postup pro jejich kvantifikaci v rostlinných pletivech použitím nových přístupů pro jejich derivatizaci a extrakci, s využitím kapalinové chromatografie ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC-MS/MS) jako konečnou detekční metodou. Tyto druhy metod jsou již popsány v literatuře, nicméně, téměř žádná z nich zatím nebyla validována. Naše výsledky ukazují, že polyaminy lze extrahovat z rostlinného materiálu velmi jednoduchou metodou s následnou derivatizací a spolehlivou separací a kvantifikací na LC-MS/MS. Úspěšné profilování polyaminů by mohlo být jedním z kroků, které pomůže stanovení jejich přesné funkce v rostlinách.Polyamines represent a wide group of aliphatic, two or more amino- group containing molecules. Their presence span from microbes to humans and all living organisms. They fulfil many different roles - mainly they serve as important molecules during biotic and abiotic stress, stabilising agents for chromatin etc. Most important and mostly studied polyamines are putrescine, spermine and spermidine with mostly unknown mode of action. Our work tries to establish a procedure for their quantification in plant tissues, using novel approaches for their derivatization and extraction, with liquid chromatography - tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) as final detection method. These kinds of methods are already shown in present literature, however, most of them have not been properly validated. Our results present, that polyamines can be extracted from plant material employing a very simple procedure, with following derivatization and reliable separation and quantification on LC-MS/MS. The resulting successful polyamine profiling should then be one of the steps to help to establish their exact functions in plants.