Diplomová práce se zabývá vývojem elektrochemických metod pro detekci a stanovení cholesterolu, cholekalciferolu a 7-dehydrocholesterolu. Voltametrické chování sterolů bylo porovnáváno na dvou pracovních elektrodách - na elektrodě ze skelného uhlíku a na bórem dopované diamantové elektrodě (BDDE), přičemž bylo prokázáno, že simultánní detekce všech tří sledovaných sterolů je možná pouze na BDDE. Vyvinutá chromatografická metoda s elektrochemickou detekcí byla použita nejprve pro analýzu sterolů po jejich extrakci z umělého krevního séra a následně i pro analýzu v lidské plazmě. Kontrolní metodou byla plynová chromatografie, jejíž výsledky byly srovnatelné s výsledky nově vyvinuté metody.The diploma thesis deals with the development of electrochemical methods for the detection and determination of cholesterol, cholecalciferol and 7-dehydrocholesterol. The voltammetric behavior of the sterols was compared on two working electrodes - a glassy carbon electrode and a boron doped diamond electrode (BDDE), and it was shown that the simultaneous detection of all three sterols is possible only on BDDE. The developed chromatographic method with electrochemical detection was used first for the analysis of sterols after their extraction from artificial blood serum and subsequently also for their analysis in human plasma. The control gas chromatography / mass spectrometry method provided results comparable to those of the newly developed method.