Tato bakalářská práce se zabývá objasněním, jak exogenně aplikované brassinosteroidy ovlivňují jejich endogenní hladiny u etiolovaných rostlin. Teoretická část popisuje vlastnosti, chemickou strukturu, biosyntézu a signální dráhu brassinosteroidů a jejich interakce s ostatními fytohormony. Vysvětluje, jaké funkce v rostlinách zastávají a jak na rostliny působí. Také seznamuje se způsoby testování, izolace z rostlinného materiálu a jejich stanovení. V experimentální části práce byl nejprve proveden biotest inhibice etiolovaného růstu rostlin hrachu setého (Pisum arvense L.), v němž jsou rostliny ovlivněny koncentrační řadou 24-epibrassinolidu. Následně byla u těchto rostlin provedena kvantifikace endogenních hladin brassinosteroidů. K jejich izolaci byla využita extrakce na pevné fázi (SPE) spolu s imunoafinitní chromatografií (IAC) a endogenní koncentrace brassinosteroidů byly stanoveny pomocí UHPLC-MS/MS analýzy. Na závěr bylo vyhodnoceno, jaké koncentrace exogenně aplikovaného 24-epibrassinolidu dokáží ovlivnit endogenní hladiny brassinosteroidů u etiolovaných rostlin.The aim of this bachelor thesis is to elucidate on how the exogenously applied brassinosteroids affect their endogenous levels. The theoretical part describes characteristic properties, chemical structure, biosynthesis and signaling pathway of the brassinosteroids, along with their interactions with other phytohormones. It presents details about their functions in a plant tissue, how they affect it, what bioassays are being used for measuring their biological activity and how they can be isolated, detected and quantified in a plant matter. In the experimental part an etiolated pea growth inhibition bioassay is performed on Pisum arvense L., during which 24-epibrassinolide is applied on etiolated seedlings in a range of concentrations from 2.10-9 to 2.10-2 M. The solid-phase extraction (SPE) and the immunoaffinity chromatography (IAC) are used for an isolation of brassinosteroids from the samples and their endogenous levels are determined by performing the UHPLC-MS/MS analysis. Thanks to obtained values it is concluded, which concentrations of exogenously applied 24-epibrassinolide do affect brassinosteroid endogenous levels in etiolated peas.