Počet záznamů: 1  

Multikomponentní analýza organických kyselin v biologických vzorcích pro laboratorní diagnostiku dědičných metabolických poruch

  1. Údaje o názvuMultikomponentní analýza organických kyselin v biologických vzorcích pro laboratorní diagnostiku dědičných metabolických poruch [rukopis] / Barbora Piskláková
    Další variantní názvyMultikomponentní analýza organických kyselin v biologických vzorcích pro laboratorní diagnostiku dědičných metabolických poruch
    Osobní jméno Piskláková, Barbora, (autor diplomové práce nebo disertace)
    Překl.názMulticomponent analysis of organic acids in biological samples for laboratory diagnosis of hereditary metabolic disorders
    Vyd.údaje2020
    Fyz.popis142 s. (179 000 znaků) : tab.
    PoznámkaVed. práce David Friedecký
    Oponent Josef Bártl
    Dal.odpovědnost Friedecký, David (vedoucí diplomové práce nebo disertace)
    Bártl, Josef, (oponent)
    Dal.odpovědnost Univerzita Palackého. Katedra biochemie (udelovatel akademické hodnosti)
    Klíč.slova Dědičné metabolické poruchy * organické acidémie * kapalinová chromatografie * hmotnostní spektrometrie * Inherited metabolic disorders * organic acidemias * liquid chromatography * mass spectrometry
    Forma, žánr diplomové práce master's theses
    MDT (043)378.2
    Země vyd.Česko
    Jazyk dok.čeština
    Druh dok.PUBLIKAČNÍ ČINNOST
    TitulMgr.
    Studijní programNavazující
    Studijní programBiochemie
    Studijní oborBiochemie
    kniha

    kniha

    Kvalifikační práceStaženoVelikostdatum zpřístupnění
    00234344-119927450.pdf574.6 MB11.05.2020
    PosudekTyp posudku
    00234344-ved-472058105.pdfPosudek vedoucího
    00234344-opon-154437091.pdfPosudek oponenta

    Organické acidémie jsou velkou skupinou dědičných metabolických poruch, které způsobují akumulaci organických kyselin v tělních tekutinách, narušují tak acidobazickou rovnováhu a vedou k progresivní encefalopatii. Současná analýza organických kyselin se provádí pomocí GC-MS, která ale trpí určitými nedostatky, mezi které patří především časová náročnost a potřeba většího množství vzorku. V teoretické části této práce jsou zpracovány dosavadní poznatky o organických acidémiích, možnostech jejich diagnostiky a současný stav analýzy organických kyselin. V praktické části byla provedena optimalizace LC-MS metody, byla ověřena linearita odezvy a byly také vypočítány LOD a LOQ všech metabolitů. Byla stanovena stabilita vybraných oxokyselin za různých teplot skladování a byla provedena analýza vzorků močí pro laboratorní diagnostiku DMP. Metoda bylo optimalizována pro 151 metabolitů pokrývající velmi širokou škálu organických acidémií, bylo možné také jednoznačně identifikovat veškeré izomery. Jako nejvhodnější teplota pro skladování vzorků močí z hlediska stability oxokyselin se obecně jeví teplota -80 °C, naopak pro skladování vodných roztoků standardů +4 °C. Analýzou vzorků močí nově vyvinutou LC-MS metodou se podařilo diagnostikovat pacienty s methylmalonovu acidémií, leucinózou, glutarovou acidurií typu I a ß-ketothiolasovou deficiencí.Organic acidemias are a big group of inborn errors of metabolism that cause an accumulation of organic acids in body fluids which disrupts acid-base balance leading to progressive encephalopathy. Current organic acids analysis is provided by GS-MS, which is however time-consuming and requires a larger amount of sample. In the theoretical part of this thesis is processed current knowledge of organic acidemias, their diagnostic options and current state of organic acids analysis. In the experimental part the LC-MS method was optimized, the linearity of the response was verified and the LOD and LOQ of all metabolites were also calculated. The stability of selected oxoacids at different storage temperatures was determined and urine samples were analysed for laboratory diagnosis of IEM. The method was optimized for 151 metabolites covering a very wide range of organic acidemias, it was also possible to unambiguously identify all isomers. The most suitable temperature for the storage of urine samples for oxoacid stability appears to be in general -80 °C, vice versa for the storage of aqueous solutions standards +4 °C. Analysis of urine samples by the newly developed LC-MS method managed to diagnose patients with methylmalonic acidemia, maple syrup urine disease, glutaric aciduria type I and ß- ketothiolase deficiency.

Počet záznamů: 1  

  Tyto stránky využívají soubory cookies, které usnadňují jejich prohlížení. Další informace o tom jak používáme cookies.