Cílem diplomové práce je navrhnout a optimalizovat diagnostickou metodu, kterou by bylo možné detekovat přítomnost bodových mutací nukleotidů 1710 a 1712 ve VmNa genu pro napěťově řízený sodíkový kanál kleštíka včelího (Varroa destructor), které vedou k aminokyselinovým substitucím na pozici 925 a způsobují tak rezistenci tohoto parazita k přípravkům obsahujícím tau-fluvalinát. Teoretická část práce je zaměřena na biologii kleštíka včelího, mechanismy vzniku rezistence roztočů, varroacidní látky a na metody sloužící k molekulární detekci rezistence roztočů. V rámci experimentální části práce byla vytvořena a zoptimalizována Tříprimerová alelicky specifická PCR (3-PAS-PCR) diagnostická metoda umožňující snadnou a spolehlivou detekci wild-type a všech mutantních genotypů, které byly doposud identifikovány ve vztahu k rezistenci kleštíka k tau-fluvalinátu.The purpose of this master thesis is to design and optimize a diagnostic method which could be used for detection of point mutations of nucleotides 1710 and 1712 in Varroa destructor voltage-gated sodium channel gene (VmNa) which lead to amino acid substitutions at position 925 and so they are responsible for Varroa tau-fluvalinate resistance. The theoretical part is devoted to a biology of Varroa mite, to resistance mechanisms, varroacid substances and to diagnostic methods for mite resistance detection. In the experimental part Three primered allele specific PCR (3-PAS-PCR) diagnostic method was created and optimalized, this method enables a basic and reliable detection of wild-type and all mutant genotypes which were identified in relation to Varroa tau-fluvalinate resistance.