Počet záznamů: 1
Využití sekvencí inteinového typu při purifikaci heterologně produkovaných proteinů
Údaje o názvu Využití sekvencí inteinového typu při purifikaci heterologně produkovaných proteinů [rukopis] / Jan Jurečka Další variantní názvy Využití sekvencí inteinového typu pro purifikaci heterologně produkovaných proteinů Osobní jméno Jurečka, Jan, (autor diplomové práce nebo disertace) Překl.náz Usage of intein-type sequences in heterologous protein purification Vyd.údaje 2018 Fyz.popis 38 s. Poznámka Ved. práce Petr Galuszka Oponent Ondřej Plíhal Dal.odpovědnost Galuszka, Petr (vedoucí diplomové práce nebo disertace) Plíhal, Ondřej (oponent) Dal.odpovědnost Univerzita Palackého. Katedra buněčné biologie a genetiky (udelovatel akademické hodnosti) Klíč.slova intein * proteinový konstrukt * purifikace * katelicidin * plasmid * chitin-vazebná doména * exprese * intein * protein construct * purificatoin * cathelicidin * plasmid * chitin-binding domain * expression Forma, žánr bakalářské práce bachelor's theses MDT (043)378.22 Země vyd. Česko Jazyk dok. čeština Druh dok. PUBLIKAČNÍ ČINNOST Titul Bc. Studijní program Bakalářský Studijní program Biologie Studijní obor Molekulární a buněčná biologie kniha
Kvalifikační práce Staženo Velikost datum zpřístupnění 00217694-916033167.pdf 31 1 MB 26.04.2018 Posudek Typ posudku 00217694-ved-328167092.pdf Posudek vedoucího 00217694-opon-997589534.pdf Posudek oponenta Signatura Čár.kód Lokace Dislokace Info BP-KBB/319 (PřF-KBO) 3134520726 PřF-Holice PřF, Knihovna Holice - sklad pouze prezenčně
Tato bakalářská práce se věnuje využití sekvencí inteinového typu při proteinové purifikaci. V teoretické části jsou popsány základy metod molekulárního klonování se zaměřením na plasmidové vektory. Dále jsou v teoretické části popsány různé bakteriální expresní systémy, např. sekrece proteinů do inkluzních tělísek. V další kapitole je popsán systém purifikace pomocí inteinové sekvence, mechanismy sestřihu inteinů, jejich šíření v organismu a komerční systémy které inteinové sekvence používají. Cílem experimentální části bylo klonování plasmidu nesoucí gen pro expresi katelicidinu (protein zájmu) zfuzovaný s inteinovou sekvencí a funkční ověření připraveného vektoru v E. coli, tedy transformace, heterologní exprese, purifikace a detekce proteinového produktu. Klonování bylo úspěšné a exprese a purifikace po překonání určitých komplikací také.This bachelor's thesis discusses the usage of intein-type sequences in protein purification. The theoretical part describes the basics of molecular cloning, focusing on plasmid vectors. Next, the theoretical part describes various bacterial expression systems, for example protein secretion into inclusion bodies. The next chapter describes the system of purification using intein sequences, mechanisms of intein cleavage, their spread in the organism and commercial systems that utilize intein sequences. The goals of the experimental part were cloning the plasmid carrying a gene for cathelicidin expression (target protein) fused with an intein sequence and functional verification of the prepared vector in E. coli, i.e. transformation, heterologous expression, purification and detection of the protein product. The cloning was successful and after overcoming certain complications, so was the expression and purification.
Počet záznamů: 1