Táto práca sa zameriava na stanovenie amanitínov. V teoretickej časti sú popísané hubové toxíny, a to konkrétne alfa a beta-amanitín, intoxikácie hubovými toxínmi, existujúce metódy stanovenia amanitínov a taktiež derivatizačné reakcie. Experimentálna časť je zameraná na úpravu vzoriek s použitím vhodných rozpúšťadiel, postup derivatizácie a nastavenie parametrov merania v systéme UHPLC-MS/MS. Cieľom práce bolo zlepšenie podmienok pre detekciu alfa alebo beta-amanitínu v pripravených vzorkách metódou UHPLC-MS/MS. Súčasťou optimalizácie metódy bola úprava vzoriek derivatizáciou dansyl chloridom za účelom zvýšenia signálu vzorky pri meraní. Dansylované vzorky boli ďalej alkylované (methylované), čo z nich robí permanentné katióny a tým ďalej zvyšuje účinnosť ionizácie analytov. V rámci práce bol vytvorený protokol pre dansyláciu a následnú methyláciu beta-amanitinu a bola porovnaná odozva obidvoch derivátov v MS/MS.This diploma thesis deals with determination of amanitins. Theoretical part of this thesis describes fungal toxins, alfa and beta-amanitin, intoxications, various methods of determination of amanitins and derivatization reactions. Experimental part of the thesis aims at preparation of samples using appropriate solvents, process of derivatization and setting of measurement parameters in the UHPLC-MS/MS. The aim of the work was to improve conditions for the detection of alpha and beta-amanitin in prepared samples by UHPLC-MS/MS. A part of the method optimalization was the preparation of samples by deriatization with dansyl chloride to increase signal of the measurement. The dansylated samples were further alkylated (methylated) which make them permanent cations and they enhance the ionization efficiency of the analytes. Within the frame of work, a protocol for dansylation and subsequent methylation of beta-amanite was made and was compared of the response of both derivatives in MS / MS.