Práce se zabývá vývojem a optimalizací metody pro stanovení 6-thioguaninu v DNA. Teoretická část byla zaměřena na rešerši způsobů hydrolýzy DNA a stanovení 6-thioguaninu v biologické matrici. Pro vývoj metody byla použita metoda kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostní spektrometrií, konkrétně hydrofilní interakční chromatografie. Analyty byly separovány na koloně založené na hybridním sorbentu "BEH" a ionizovány za pomoci elektrospreje v kladném ionizačním módu. Mobilní fáze byly složeny z kyselé vodné fáze a organické fáze. Jako vhodné hydrolyzační činidlo byla vybrána kyselina mravenčí.The thesis deals with the development and optimization of the method for determination of 6-thioguanine in DNA. The theoretical part was focused on the search of methods for DNA hydrolysis and determination of 6-thioguanine in biological matrix. During development of this method liquid chromatography hydrophilic interaction chromatography was used coupled to mass spectrometry. The analytes were separated on a column based on the hybrid sorbent "BEH" and ionized by electrospray in positive ionization mode. The mobile phases were composed of an acidic aqueous phase and an organic phase. Formic acid was chosen as a suitable hydrolyzing agent.