Počet záznamů: 1  

Studium variant aldehyddehydrogenasy 21 (ALDH21) z mechu Physcomitrella patens

  1. Údaje o názvuStudium variant aldehyddehydrogenasy 21 (ALDH21) z mechu Physcomitrella patens [rukopis] / Lenka Jašková
    Další variantní názvyStudium variant aldehyddehydrogenasy 21 (ALDH21) z mechu Physcomitrella patens
    Osobní jméno Jašková, Lenka (autor diplomové práce nebo disertace)
    Překl.názStudy on variants of aldehyde dehydrogenase 21 (ALDH21) from moss Physcomitrella patens
    Vyd.údaje2017
    PoznámkaOponent Marek Petřivalský
    Ved. práce David Kopečný
    Dal.odpovědnost Petřivalský, Marek, 1969- (oponent)
    Kopečný, David (vedoucí diplomové práce nebo disertace)
    Dal.odpovědnost Univerzita Palackého. Katedra biochemie (udelovatel akademické hodnosti)
    Klíč.slova Aldehyddehydrogenasa * ALDH * Physcomitrella patens * mech * mutageneze * rekombinantní protein * enzymová kinetika * Aldehyde dehydrogenase * ALDH * Physcomitrella patens * moss * mutagenesis * recombinant protein * enzyme kinetics
    Forma, žánr diplomové práce master's theses
    MDT (043)378.2
    Země vyd.Česko
    Jazyk dok.čeština
    Druh dok.PUBLIKAČNÍ ČINNOST
    TitulMgr.
    Studijní programNavazující
    Studijní programBiochemie
    Studijní oborBiochemie
    kniha

    kniha

    Kvalifikační práceStaženoVelikostdatum zpřístupnění
    00214139-330167148.pdf034 B31.12.2999
    PosudekTyp posudku
    00214139-ved-407497075.pdfPosudek vedoucího
    00214139-opon-767426651.pdfPosudek oponenta

    Tato práce se zabývá studiem aktivního místa aldehyddehydrogenasy 21 (ALDH21) z mechu Physcomitrella patens. Teoretická část je zaměřena na rešerši současných poznatků o mechu P. patens a nadrodině rostlinných aldehyddehydrogenas. Praktická část zahrnuje místně-řízenou mutagenezi genu PpALDH21, heterologní expresi mutantních forem v Escherichia coli a purifikaci rekombinantních proteinů afinitní chromatografií. Čistota proteinů byla ověřena pomocí SDS-PAGE a sekundární struktura byla ověřena pomocí CD-spektroskopie. U jednotlivých variant PpALDH21 byly následně spektrofotometricky testovány změny v substrátové specificitě, kinetických parametrech a teplotní stabilitě. Výsledky ukazují na význam jednotlivých aminokyselinových reziduí v aktivním místě pro správnou katalytickou funkci enzymu a oxidaci preferovaného substrátu.The thesis is focused on a study of the active site of aldehyde dehydrogenase 21 (ALDH21) from the moss Physcomitrella patens. The theoretical part summarizes the present knowledge of moss P. patens and plant aldehyde dehyderogenase superfamily. The practical part deals with site-directed mutagenesis of PpALDH21 gene, heterologous expression of the mutant variants in Escherichia coli and purification of recombinant proteins by affinity chromgatography. Purity of the final proteins was verified by SDS-PAGE and proper protein folding was confirmed by CD spectroscopy. Each PpALDH21 variant was subsequently spectrophotometrically assayed for changes in its substrate specificity, kinetic parameters and thermal stability. The results show the importance of individual amino acid residues in the active site for a proper catalytic function of the enzyme and oxidation of the preferred substrate.

Počet záznamů: 1  

  Tyto stránky využívají soubory cookies, které usnadňují jejich prohlížení. Další informace o tom jak používáme cookies.