Teoretická část diplomové práce je zaměřena na analýzu léčiv hmotnostní spektrometrií. Dále se práce zaměřuje na desorpční techniky hmotnostní spektrometrie, konkrétně na desorpční nanoelektrosprej (nanoDESI), vyvinutý na Katedře analytické chemie, Přírodovědecké fakulty, Univerzity Palackého v Olomouci, transmisní desorpční elektrosprej (TM-DESI) a desorpci/ionizaci laserem za účasti matrice (MALDI) a příkladů jejich použití. Jsou zde zmíněny analyzátory, které lze využít pro spojení s desorpčními technikami. Následující kapitoly pak pojednávají o výkladu základních pojmů, jako je léčivo, účinná látka, pomocná látka, léčivý přípravek, a samotném rozdělení léčiv do různých kategorií. Poslední část se zabývá analýzou vybraných účinných látek, kterými byly kyselina acetylsalicylová, paracetamol, ibuprofen a kofein. Experimentální část se věnuje desorpčním technikám, vyjmenovaným výše, v analýze léčiv hmotnostní spektrometrií a jejich porovnáním. Dále je zkoumán vliv přípravy vzorků u jednotlivých technik. U ionizačních technik laserem (MALDI-QTOF a MALDI-SYNAPT) je také zkoumán vliv matric. Výsledky těchto experimentů ukazují na lepší odezvy a rychlosti měření technikami nanoDESI-QTOF a TM DESI-QTOF než technikami MALDI. MALDI techniky však oproti DESI technikám mají výhodu v měření v sekvenci.Theoretical part of diploma thesis is focused on drug analysis by mass spectrometry. Further, the thesis focuses on desorption ionization techniques of mass spectrometry, namely a desorption nanoelectrospray ionization (nanoDESI), developed at the Department of Analytical Chemistry, Faculty of Science, Palacky University in Olomouc, transmission mode desorption electrospray ionization (TM-DESI), and matrix assisted laser desorption/ionization (MALDI), and examples of their usage. There are mentioned some analyzers which can be used for connection with desorption ionization techniques. Following chapters describe the interpretation of basic concepts, such as a drug, active substance, excipient, medicinal preparation, and the sort of drugs into different categories. The last part deals with analysis of selected active substances which were acetylsalicylic acid, paracetamol, ibuprofen, and caffeine. The experimental part focuses on desorption ionization techniques listed above in the analysis of pharmaceuticals by mass spectrometry and their comparison. It is also studied the influence of sample preparation for each of techniques. The influence of matrixes is studied for laser ionization techniques (MALDI-QTOF and MALDI-SYNAPT). The results of these experiments showed a better response and speed of measurements by techniques nanoDESI-QTOF and TM-DESI-QTOF than MALDI techniques. However, MALDI techniques in compared with DESI techniques have the advantage in measurement in sequence.