Tato práce se věnuje cílené mutagenezi nukleosid-N-ribohydrolasy 3 z kukuřice seté (ZmNRH3) a následné charakterizaci několika mutantních forem. Cílem v teoretické části práce bylo zpracovat přehlednou rešerši, která bude zahrnovat metabolismus purinů a pyrimidinů v rostlinách a dále přítomnost a funkci dosud popsaných nukleosid-N-ribohydrolas v různých organismech. V praktické části této práce bylo provedeno klonování, místně cílená mutageneze, exprese ZmNRH3 v buňkách E. coli, purifikace rekombinantního proteinu ZmNRH3-WT a dalších 7 mutantních forem K279A, W226A, W226Y, Y231A, Y231D, H81A a H239A.This master thesis focuses on site-directed mutagenesis of nucleoside-N-ribohydrolase 3 from maize (ZmNRH3) and subsequent characterization of several mutant forms. The aim of the theoretical part is to provide a literature review, which will cover purine and pyrimidine metabolism in plants and the presence and function of previously described nucleoside-N-ribohydrolases in various organisms. In the experimental part of this work, cloning, site-directed mutagenesis of ZmNRH3 and the expression in E. coli were performed followed by purification of recombinant protein ZmNRH3-WT and other seven mutant variants K279A, W226A, W226Y, Y231A, Y231D, H81A and H239A.