Kolorektální karcinom je třetí nejčastější nádorové onemocnění nejen v České republice, ale i ve světě. Léková rezistence a recidiva tohoto onemocnění jsou hlavním problémem klinické praxe navzdory dostupnosti standardní léčby. Efektivní výběr protinádorových léčiv v preklinickém stadiu výzkumu léčiv vyžaduje vhodné in vitro buněčné modely, které napodobují podmínky in vivo nádorů. Základní laboratorní technikou pro kultivaci buněk je v současnosti dvourozměrná kultura, kde však nelze adekvátně reprodukovat podmínky in vivo nádorů. Proto se dostávají do popředí trojrozměrné kultury, jež jsou vhodným a cenově dostupným modelem napodobujícím fyziologické podmínky nádorů. Tato práce je zaměřena na vývoj podmínek vhodných pro růst trojrozměrné kultury kolorektálního karcinomu a následnou protinádorovou léčbu.Colorectal cancer is third most common cancer not only in the Czech Republic, but also in the world. Despite the availability of standard treatment, tumor relapse and drug resistance are major clinical challenges. Effective selection of anticancer drugs in preclinical stages of drug discovery requires suitable in vitro cell models that mimic the in vivo tumor conditions. The current basic laboratory techniques of culture of cancer cells in the two-dimension do not adequately reproduce these in vivo tumor conditions. However, the use of three-dimensional cultures of cancer cells is becoming a highly appropriate and affordable system for effective screening of anticancer drugs under physiologically-relevant tumor conditions. This thesis focuses on the development of culture conditions for three-dimensional cultures of colorectal cancer cells as multicellular tumor spheroids for anticancer drug screening.