Počet záznamů: 1  

Subcellular localization of maize cytokinin dehydrogenases

  1. Údaje o názvuSubcellular localization of maize cytokinin dehydrogenases [rukopis] / Patricie Johnová
    Další variantní názvySubcelulární lokalizace kukuřičných cytokinindehydrogenas
    Osobní jméno Johnová, Patricie (autor diplomové práce nebo disertace)
    Překl.názSubcellular localization of maize cytokinin dehydrogenases
    Vyd.údaje2015
    Fyz.popis69 : il., schémata, tab.
    PoznámkaVed. práce David Zalabák
    Oponent Georgios Komis
    Dal.odpovědnost Zalabák, David (vedoucí diplomové práce nebo disertace)
    Komis, Georgios (oponent)
    Dal.odpovědnost Univerzita Palackého. Katedra biochemie (udelovatel akademické hodnosti)
    Klíč.slova Cytokinin dehydrogenases (CKX * EC 1.5.99.12) belong to the important class of enzymes mediating irreversible degradation of plant hormones cytokinins and thus contribute to the maintainance of cytokinin homestasis. Presence of small CKX gene families have been reported in many plant species. One of the unique aspects of CKX isozymes is * which is also assumed to be responsible for preferences of CKX to various substrates. So far * best characterized is AtCKX gene family from dicotyledonous plant model Arabidopsis thaliana * comprising seven members. Overexpression of AtCKX genes proved that distinct subcellular localization along with the distinct temporal distribution of CKX have strong impact on plant phenotype * as a result of cytokinin-deficient syndrome. The maize genome encompasses thirteen ZmCKX members * whose biochemical properties as well as tissue expression patterns were described in detail only recently. However
    whose biochemical properties as well as tissue expression patterns were described in detail only recently. However * the information on the CKX subcellular localization in monocots is still not clear. Previously only two isoforms has been studied in detail: ZmCKX1 which was shown to be secreted to apoplastic space and ZmCKX10 indicating dual expression pattern * partially in cytosol and nucleus.The goal of the present study was to disclose subcellular distribution of ten ZmCKX isozymes. Individual ZmCKX (1 * 2 * 4a * 4b * 5 * 6 * 8 * 9 * 10 and 12) genes were tagged to green fluorescent protein (GFP) and their expression pattern was examined using live cell confocal microscopy. Transient expression of Ubi1::ZmCKX-GFP in maize protoplasts * revealed the majority of ZmCKX isoforms is associated with endoplasmic reticulum (ER). In order to confirm these results stable cell lines of Arabidopsis expressing CaMV35S::ZmCKX-GFP were established. Surprisingly
    revealed the majority of ZmCKX isoforms is associated with endoplasmic reticulum (ER). In order to confirm these results stable cell lines of Arabidopsis expressing CaMV35S::ZmCKX-GFP were established. Surprisingly * almost all ZmCKXs were primarily targeted to vacuoles. These results refer to the possibility that ER-localization is a transition point to vacuoles * which seems to be the final destination of most of the ZmCKX isozymes. In addition * the localization of apoplastic isoform ZmCKX1 * and cytosolic/nuclear ZmCKX10 was proved in both assays. This study provided the first insight into the spatial distribution of cytokinin catabolism in monocotyledonous species
    Forma, žánr diplomové práce master's theses
    MDT (043)378.2
    Země vyd.Česko
    Jazyk dok.angličtina
    Druh dok.PUBLIKAČNÍ ČINNOST
    TitulMgr.
    Studijní programNavazující
    Studijní programBiochemie
    Studijní oborBiochemie
    Kvalifikační práceStaženoVelikostdatum zpřístupnění
    00187844-701735519.pdf642 MB30.04.2015
    PosudekTyp posudku
    00187844-ved-863188475.pdfPosudek vedoucího
    00187844-opon-420974641.pdfPosudek oponenta
    Průběh obhajobydatum zadánídatum odevzdánídatum obhajobypřidělená hodnocenítyp hodnocení
    00187844-prubeh-780085123.docx01.09.201130.04.201525.05.20151Hodnocení známkou
    SignaturaČár.kódLokaceDislokaceInfo
    DP-KBC/233 (PřF-KBO)3134517945PřF-HolicePřF, Knihovna Holice - skladpouze prezenčně

    Cytokinindehydrogenasy (CKX; EC 1.5.99.12) patří do významné třídy enzymů, které zprostředkovávají irreversibilní degradaci rostlinných hormonů cytokininů a přispívají tak k udržování jejich rovnováhy. V mnoha rostlinných druzích byly nalezeny malé genové rodiny CKX. Jedním z jedinečných aspektů CKX je jejich odlišná subcelulární lokalizace, která zřejmě úzce souvisí s jejich odlišnou substrátovou specifitu. Doposud byla nejlépe charakterizována rodina AtCKX modelové dvouděložné rostliny Arabidopsis thaliana, která čítá sedm členů. Bylo dokázáno, že odlišná subcelulární lokalizace spolu s odlišnou časovou distibucí CKX mají silný vliv na fenotyp rostlin overexprimujících AtCKX, což vede ke vzniku typického fenotypu z nedostatku cytokininů. Genom kukuřice zahrnuje celkem třináct genů ZmCKX, jejichž biochemické vlastnostni a expresní profil v jednotlivých pletivech byly pospsány teprve nedávno. Nicméne, informace o subcelulární lokalizaci jednotlivých CKX v jednoděložných rostlinách nejsou stále jasné. V předchozích studiích byly detailně charakterizovány pouze dvě isoformy ZmCKX, přičemž se ukázalo, že ZmCKX1 je sekretována do apoplastu a ZmCKX10 se vyskytuje v cytosolu a zřejmě i v jádře.Cílem předkládané práce bylo zjistit subcellularní lokalizaci deseti isoenzymů ZmCKX. Jednotlivé ZmCKX (1, 2, 4a, 4b, 5, 6, 8, 9, 10 and 12) byly fúzovány se zeleným fluorescenčním proteinem (GFP) a za použití laserové skenovací konfokální mikroskopie byla studována jejich lokalizace na subcelulární úrovni. Transietní expresí Ubi1::ZmCKX-GFP v protoplastech kukuřice bylo zjištěno, že většina ZmCKX je asociována s endoplasmatickým retikulem (ER). K potvrzení těchto výsledků byly odvozeny stabilní buněčné linie Arabidopsis, exprimující CaMV35S::ZmCKX-GFP. Téměř všechny isoformy ZmCKX byly překvapivě nalezeny ve vakuolách. Tyto výsledky poukazují na možnost, že lokalizace v ER je pouze přechodným bodem před vstupem ZmCKX do vakuol, které jsou zřejmě cílem většiny isoenzymů ZmCKX. Vedle toho byla v experimentálně potvrzena apoplastická lokalizace ZmCKX1 a cytosolární/jaderná lokalizace ZmCKX10. Tato práce jako první poskytla náhled na distribuci cytokininového katabolismu v jednoděložných rostlinách.

Počet záznamů: 1  

  Tyto stránky využívají soubory cookies, které usnadňují jejich prohlížení. Další informace o tom jak používáme cookies.