Počet záznamů: 1  

Průkaz a stanovení vybraných amatoxinů ve vzorcích s biologickou matricí

  1. Údaje o názvuPrůkaz a stanovení vybraných amatoxinů ve vzorcích s biologickou matricí [rukopis] / Veronika Saparová
    Další variantní názvyPrůkaz a stanovení vybraných amatoxinů ve vzorcích s biologickou matricí
    Osobní jméno Saparová, Veronika (autor diplomové práce nebo disertace)
    Překl.názDetection and determination of selected amatoxins in samples with biological matrix
    Vyd.údaje2015
    Fyz.popis71 s. (12 129 znaků) : il., grafy, tab.
    PoznámkaVed. práce Petr Fryčák
    Oponent Pavlína Ginterová
    Dal.odpovědnost Fryčák, Petr (vedoucí diplomové práce nebo disertace)
    Ginterová, Pavlína (oponent)
    Dal.odpovědnost Univerzita Palackého. Katedra analytické chemie (udelovatel akademické hodnosti)
    Klíč.slova alfa-amanitin * beta-amanitin * LC-MS * muchomůrka zelená * SPE extrakce * alfa-amanitine * beta-amanitine * LC-MS * Amanita phalloides * SPE extraction
    Forma, žánr diplomové práce master's theses
    MDT (043)378.2
    Země vyd.Česko
    Jazyk dok.čeština
    Druh dok.PUBLIKAČNÍ ČINNOST
    TitulMgr.
    Studijní programNavazující
    Studijní programChemie
    Studijní oborAnalytická chemie
    kniha

    kniha

    Kvalifikační práceStaženoVelikostdatum zpřístupnění
    00187411-993002204.pdf951.3 MB24.04.2015
    PosudekTyp posudku
    00187411-ved-620484988.pdfPosudek vedoucího
    00187411-opon-618989539.pdfPosudek oponenta
    Průběh obhajobydatum zadánídatum odevzdánídatum obhajobypřidělená hodnocenítyp hodnocení
    00187411-prubeh-598472351.pdf01.10.201224.04.201518.05.20151Hodnocení známkou

    Tato diplomová práce se zabývá problematikou houbových otrav především faloidního typu, které jsou způsobeny požitím muchomůrky zelené. Teoretická část diplomové práce popisuje různé druhy otrav, toxiny způsobující otravu organismu a také množství metod, které již byly vyvinuty za účelem rychlého a spolehlivého stanovení houbových toxinů. Praktická část diplomové práce se zaměřuje na vyvinutí rychlé a jednoduché LC-MS metody pro stanovení amatoxinů muchomůrky zelené a to konkrétně alfa-amanitinu a beta-amanitinu. K tomuto účelu bylo použito spojení vysokoúčinné kapalinové chromatografie s hmotností detekcí využívající trojitý kvadrupól. V praktické části je zahrnuta také extrakce a stanovení těchto toxinů v muchomůrce zelené, v houbové polévce a v moči. Vzorky moče byly spikovány alfa-amanitinem na koncentraci 5 ng/ml. Kvantifikace amatoxinů probíhala metodou kalibrační křivky sestrojené za použití kyseliny dinitrobenzoové jako interního standardu. Extrakce analytů byla provedena na SPE kolonkách. Použitím dipeptidu při SPE se zvýšila návratnost amatoxinů na 94 %. Metoda je dostatečně citlivá jak pro stanovení amatoxinů například ve zbytcích potravy, tak v moči, kde je obsah amatoxinů nižší. Alfa-amanitin byl derivatizován dansyl-chloridem za účelem zvýšení odezvy. Bylo zjištěno, že derivatizace nemá významný vliv na odezvu alfa-amanitinu. Metodou bylo dosaženo meze detekce 5 ng/ml pro alfa-amanitin a 10 ng/ml pro beta-amanitin. Mez kvantifikace byla stanovena na 30 ng/ml pro alfa-amanitin a 100 ng/ml pro beta-amanitin.This diploma thesis deals with mushroom poisoning especially of faloidic type which is caused by ingestion of Amanita phalloides. The theoretical part of the thesis describes various types of poisoning, toxins which cause poisoning of an organism and also a lot of methods that have been developed for rapid and reliable determination of fungal toxins. Experimental part of the thesis aims to develop rapid and simple LC-MS method for the determination of amatoxins of Amanita phalloides namely alfa-amanitine and beta-amanitine. This was achieved by employing high performance liquid chromatography with mass spectrometric detection using a triple quadrupole analyser. The experimental part also includes the extraction, determination and quantification of these amatoxins in Amanita phalloides, mushroom soup and urine. The urine samples were spiked with alfa-amanitine at a concentration of 5 ng/ml. The quantification of the amatoxins was based on a calibration curve that had been created using dinitrobenzoic acid as an internal standard. The extraction of the analytes was perfomed using SPE columns. Recovery of the amatoxins have increased to 94 % using a dipeptide during the SPE. The method is sufficiently sensitive to determine the amatoxins both in e.g. residues of food and in the urine samples, where the content of the amatoxins is lower. Alfa-amanitine was derivatized with dansyl-chloride in order to increase its response. It was found, however that the derivatization had no significant effect on increasing its response. The method has reached a detection limit of 5 ng/ml for the alfa-amanitine and 10 ng/ml for the beta-amanitine. The limit of quantification was set at 30 ng/ml for the alfa-amanitine and 100 ng/ml for the beta-amanitine.

Počet záznamů: 1  

  Tyto stránky využívají soubory cookies, které usnadňují jejich prohlížení. Další informace o tom jak používáme cookies.